發(fā)布時(shí)間：2023-12-25 14:38:39
序言：寫作是分享個(gè)人見(jiàn)解和探索未知領(lǐng)域的橋梁，我們?yōu)槟x了8篇的生物細(xì)胞分析樣本，期待這些樣本能夠?yàn)槟峁┴S富的參考和啟發(fā)，請(qǐng)盡情閱讀。
【關(guān)鍵詞】孕中期羊水;間充質(zhì)干細(xì)胞;臍血
間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells，MSCs)具有多向分化潛能,是細(xì)胞治療及基因治療的理想種子細(xì)胞。已有研究顯示羊水[1]和臍血[2]可以分離出MSCs，那么這兩種來(lái)源的MSCs有哪些異同呢?為此本研究將對(duì)孕中期人的羊水及新生兒的臍血進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng)，并對(duì)其基本生物學(xué)特性進(jìn)行了比較研究，為組織工程選取種子細(xì)胞提供基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下論文。
1材料與方法
1.1標(biāo)本來(lái)源
羊水標(biāo)本取自2008年3月至2010年3月吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬465醫(yī)院婦產(chǎn)科，妊娠在15～22周的引產(chǎn)羊水35份;32份臍帶血標(biāo)本取自正常足月剖腹產(chǎn)或足月正常產(chǎn)乙肝病毒檢測(cè)陰性的孕婦。取標(biāo)本前均征得孕婦本人同意，研究獲得吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬465醫(yī)院道德倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
1.2主要試劑與儀器
PRMI1640(GIBCOBRL)，胎牛血清(GIBCOBRL)，馬血清(GIBCOBRL)，1.077×103g/LFicoll淋巴細(xì)胞分離液(上海試劑二廠)，細(xì)胞化學(xué)染色試劑盒(BASO公司)，CO2培養(yǎng)箱(FormaScientific公司)，熒光倒置顯微鏡(TE300,Nikon公司)。
1.3孕中期羊水MSCs的分離與培養(yǎng)羊水標(biāo)本在室溫下1500r/min離心5min，棄上清，加入含10%胎牛血清(FBS)的PRMI1640培養(yǎng)液，制成密度為(1～5)×105個(gè)/mL的單細(xì)胞懸液，接種到φ60mm塑料培養(yǎng)皿中，置飽和濕度、37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。第3天首次換液，去除非貼壁細(xì)胞，當(dāng)類成纖維樣細(xì)胞鋪滿平皿達(dá)80%時(shí)，用0.25%的胰酶消化，用PRMI1640培養(yǎng)液制成濃度為4×104個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，接種到新培養(yǎng)皿中，記為第1代(P1)。每3d用含10%FBS的PRMI1640培養(yǎng)液換液1次，細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)到90%融合時(shí)按1∶4的比例傳代。
1.4新生兒臍帶血MSCs的分離與培養(yǎng)無(wú)菌條件下取正常足月剖腹產(chǎn)或足月正常產(chǎn)乙肝病毒檢測(cè)陰性孕婦的臍帶血50～80mL，放于含CPDA1復(fù)合抗凝劑的采血袋中，所有樣本均在采集后12h內(nèi)進(jìn)行分離;將臍血用等量的DHank′s液稀釋制成細(xì)胞懸液,細(xì)胞懸液沿管壁緩慢加入到相對(duì)密度為1.077×103g/LFicoll人淋巴細(xì)胞分離液上層,其比例為2∶1,注意液面清晰分層，以1500r/min進(jìn)行梯度離心20min，然后緩慢吸取中間交界面細(xì)胞懸液至另一離心管，獲得含人MSCs的單個(gè)核細(xì)胞懸液，加入含10%FBS的PRMI1640完全培養(yǎng)基,吹打并計(jì)數(shù)。以5×105個(gè)/mL的密度接種到φ60mm培養(yǎng)皿中，48h首次換液,以后每3d換液。換液用含10%FBS的PRMI1640完全培養(yǎng)基。在細(xì)胞80%左右融合時(shí),用0.25%胰酶室溫消化5min，適量小牛血清終止消化反應(yīng)，吸管輕輕吹打，轉(zhuǎn)入離心管中1500r/min離心10min，棄上清，按1∶3比例傳代。
1.5MSCs的生長(zhǎng)曲線測(cè)定將傳至3、5、8代的MSCs制備成單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為5×104/mL，接種于24孔培養(yǎng)板，每孔0.5mL;每天取3孔，消化后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，共8d。以時(shí)間(d)為橫坐標(biāo),細(xì)胞數(shù)為縱坐標(biāo)，繪制生長(zhǎng)曲線。
1.6MSCs的代謝情況檢測(cè)傳3代的羊水MSCs按5×104/mL密度接種于φ35mm的培養(yǎng)皿中。2d后分別對(duì)培養(yǎng)皿中的細(xì)胞進(jìn)行POX、SB、PAS、αNAE和ALP細(xì)胞化學(xué)染色，顯微鏡觀察、拍照。同樣，新生兒臍血源性MSCs取第3代以后細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞化學(xué)染色分析。
2結(jié)果
2.1羊水MSCs
從羊水中分離出的細(xì)胞,將之接種于PRMI1640培養(yǎng)基中,2～3d部分細(xì)胞開(kāi)始貼壁,4～7d逐漸出現(xiàn)貼壁的MSCs,開(kāi)始為圓形,逐漸伸出突起,呈成纖維樣、梭形，最初散在分布,后逐漸在局部形成集落生長(zhǎng)(圖1)。一周以后MSCs迅速擴(kuò)增(圖2),約10d后可達(dá)80%～90%融合,擴(kuò)增變緩,即可傳代。傳代后羊水MSCs5～6h即可貼壁,2～4d生長(zhǎng)迅速,1周后即可再次傳代。形態(tài)為均一的成纖維樣的MSCs，呈漩渦樣生長(zhǎng),即為羊水源性的MSCs(圖3)。
2.2新生兒臍血MSCs
臍血的單個(gè)核細(xì)胞懸液接種于φ60mm的塑料培養(yǎng)皿中，原代培養(yǎng)6d后，在倒置顯微鏡下可見(jiàn)單個(gè)或少量呈集落生長(zhǎng)的貼壁細(xì)胞，形態(tài)大多為橢圓形或短梭形，凸出于培養(yǎng)皿表面。粘附于貼壁細(xì)胞之上的造血細(xì)胞和其他細(xì)胞在換液的過(guò)程中逐漸被清除，10d后就形成細(xì)小纖維狀小集落，20～25d后細(xì)胞集落不斷地?cái)U(kuò)大并形成融合超過(guò)80%，細(xì)胞形態(tài)大多呈短梭形。傳代培養(yǎng)后的臍血MSCs12h即可貼壁，4～14d生長(zhǎng)迅速,10d后即可再次傳代,細(xì)胞呈短梭形生長(zhǎng)(圖4，25×)。10代左右細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)開(kāi)始急劇衰退,細(xì)胞顆?；瘒?yán)重，增殖速度嚴(yán)重放慢。
2.3MSCs的生長(zhǎng)曲線
人羊水源性MSCs生長(zhǎng)曲線呈“S”形，傳代后第1、2天為潛伏適應(yīng)期，從第3天開(kāi)始細(xì)胞增殖加速并進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，第6至7天達(dá)到高峰，以后進(jìn)入平臺(tái)期。通過(guò)對(duì)第3、5、8代新生兒臍血源性的MSCs細(xì)胞計(jì)數(shù),繪制的生長(zhǎng)曲線形狀與羊水源性MSCs生長(zhǎng)曲線形狀相似，呈S形(圖5);傳代第1至3天為生長(zhǎng)停滯期，第4對(duì)14天為快速增殖期，后即進(jìn)入平臺(tái)期。隨傳代次數(shù)增加,MSCs的增殖能力有所減弱。第3、5代細(xì)胞增殖能力最強(qiáng),第8代細(xì)胞較第3、5代細(xì)胞增殖能力減弱較明顯，但亦呈“S”形。
2.4不同源性MSCs的生物化學(xué)特征
羊水源性MSCs及臍血源性MSCs具有相同的生物化學(xué)特征，染色結(jié)果都顯示：POX、SB染色為陰性，αNAE、PAS為強(qiáng)陽(yáng)性，ALP染色有1%為弱陽(yáng)性，這與文獻(xiàn)報(bào)道的MSCs的染色特點(diǎn)相一致[34]。進(jìn)一步證明了培養(yǎng)出的成纖維樣細(xì)胞為MSCs。圖1.4d羊水貼壁細(xì)胞圖2.7d羊水貼壁細(xì)胞圖3.10d羊水貼壁細(xì)胞圖4.10d臍血貼壁細(xì)胞圖5.羊水臍血MSCs生長(zhǎng)曲線
3討論
間質(zhì)干細(xì)胞具有多向分化潛能，是細(xì)胞組織工程的首選種子細(xì)胞之一。然而人骨髓中的MSCs含量較少，大約104～105個(gè)骨髓單個(gè)核細(xì)胞中只含有一個(gè)MSCs[5],這顯然難以滿足細(xì)胞組織工程的實(shí)際需要，因此尋找MSCs的來(lái)源和如何在體外分離擴(kuò)增MSCs就顯得較為重要。為了更好的得到MSCs，我們分別對(duì)孕婦的羊水和新生兒臍帶血進(jìn)行了MSCs的分離，并對(duì)所得的MSCs生物學(xué)特性進(jìn)行了比較，以期得到更好的MSCs來(lái)源。
間充質(zhì)干細(xì)胞的分離,我們主要參考了Friedenstein建立的MSC分離方法并做了適當(dāng)?shù)母倪M(jìn)，利用MSCs的粘附性來(lái)獲得MSCs。本實(shí)驗(yàn)將羊水細(xì)胞和臍血單個(gè)核細(xì)胞接種于含10%胎牛血清PRMI1640培養(yǎng)基中，3d后去除未貼壁細(xì)胞，待細(xì)胞單層長(zhǎng)滿80%后，用胰酶消化傳代，本法可去除一些貼壁的非間質(zhì)干細(xì)胞，經(jīng)過(guò)幾次傳代后即可得到相對(duì)較純的MSCs。
本研究中采用孕婦的羊水和新生兒臍帶血標(biāo)本都可以成功地得到MSCs，這與國(guó)外報(bào)道的相一致[6]，可作為未來(lái)組織工程學(xué)的一個(gè)不可或缺的來(lái)源[7]。兩者在形態(tài)和生物學(xué)特性上都非常類似，但是臍血源性的MSCs形態(tài)呈短梭形。明顯不同的就是人羊水源性MSCs增殖能力明顯要優(yōu)于臍血源性MSCs,這一點(diǎn)可以從生長(zhǎng)曲線與傳代能力都得到較好體現(xiàn)。人羊水源性MSCs群體倍增時(shí)間較臍血源性MSCs倍增時(shí)間短，且人羊水源性MSCs的傳代能力明顯強(qiáng)于臍血源性MSCs。
綜上所述，與臍血源性間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力相比,羊水MSCs的獲得更為可觀，是組織工程種子細(xì)胞的又一可靠來(lái)源。
【參考文獻(xiàn)】
[1]馮建勛,臘曉林,馬艷,等.兩步法分離和培養(yǎng)人羊水來(lái)源胚胎間充質(zhì)干細(xì)胞及其向神經(jīng)元樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué),2009,21(12):729733.
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【關(guān)鍵詞】 骨肉瘤
Establishment of human osteosarcoma cell sublines with different potential of metastasis and studies on their biological characteristics
【Abstract】 AIM: To get human osteosarcoma cell subclones with different potential of metastasis. METHODS: We got different monocell clones by the limited dilution method from the human osteosarcoma cell line SOSP9607. After preliminary screening by in vitro invasion assay， we selected two cell lines as high metastasis potential cell subclones and three cell subclones as low metastasis potential cell subclones. We inoculated these subclones into nude mice for three circles and obtained different metastatic potential subclones. We then inspected their different biological properties by tests of cell growth curve assay， chromosome number， soft agar cloning technique， flow cytometry and auto metastasis in nude mice. RESULTS: We got the two subclones with the different metastasis potential: low potential subclone H9 and high potential subclone E10. They had the same hypotriploid karyotype with human chromosome morphology. E10 had faster growth speed than H9 and the artificial lung metastasis rate of H9 and E10 in nude mice was 10% and 100%， respectively. The rate of S phase cell cycle was respectively 16.8% and 21.0%. CONCLUSION: These two subclones come from the same mother cell line and their difference mainly lies in the different metastatic phenotype. This study will help the screening of metastasis correlated gene， the study of the metastatic mechanism and clinical study of osteosarcoma.
【Keywords】 osteosarcoma；neoplasm metastasis；cell subclone；biological specialties
【摘要】 目的：獲得不同轉(zhuǎn)移潛能的骨肉瘤細(xì)胞株. 方法：從我室建立的人成骨肉瘤細(xì)胞系SOSP9607中通過(guò)有限稀釋法獲得不同的單細(xì)胞克隆，經(jīng)過(guò)侵襲試驗(yàn)初篩后獲得5株轉(zhuǎn)移潛能不同的細(xì)胞株，再通過(guò)裸鼠體內(nèi)連續(xù)傳代法篩選出具有不同轉(zhuǎn)移能力的細(xì)胞系.并利用細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定，軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)，流式細(xì)胞儀，裸鼠體內(nèi)自發(fā)轉(zhuǎn)移試驗(yàn)分析了他們的生物學(xué)性質(zhì). 結(jié)果：獲得兩株轉(zhuǎn)移潛能不同的骨肉瘤細(xì)胞株.其中，H9為具有低轉(zhuǎn)移潛能的骨肉瘤細(xì)胞株， E10為具有高轉(zhuǎn)移潛能的骨肉瘤細(xì)胞株，其染色體眾數(shù)分布特征與母系SOSP9607基本相似，保持人類染色體核型；所至皮下移植瘤及肺轉(zhuǎn)移瘤均符合人成骨肉瘤組織學(xué)特征，它們具有差異明顯的體外生長(zhǎng)速度，軟瓊脂克隆形成率H9（22±5）明顯高于E10(98±12) ，裸鼠體內(nèi)試驗(yàn)性自發(fā)肺轉(zhuǎn)移率分別為10%和100%，流式細(xì)胞儀測(cè)定H9和E10的S期細(xì)胞分別為16.8%和21.0%. 結(jié)論：這兩株細(xì)胞株來(lái)源于同一親本，他們之間的差異集中在轉(zhuǎn)移表型上，為今后利用分子生物學(xué)的方法篩選出轉(zhuǎn)移相關(guān)基因從而為成骨肉瘤的轉(zhuǎn)移機(jī)制及臨床研究奠定基礎(chǔ).
【關(guān)鍵詞】 骨肉瘤；腫瘤轉(zhuǎn)移；細(xì)胞株；生物學(xué)特性
0引言
腫瘤轉(zhuǎn)移是一系列步驟組成的，包括侵襲周圍組織，延血管或淋巴管運(yùn)行、在靶器官上增殖等.自Fidler［1］提出腫瘤轉(zhuǎn)移異質(zhì)性概念后，國(guó)內(nèi)外已相繼有一些實(shí)驗(yàn)室建立了黑色素瘤，前列腺癌，肺癌的不同轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞亞系［2-4］.但從人骨肉瘤細(xì)胞中分離出具有不同轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤轉(zhuǎn)移亞群的報(bào)道卻不多見(jiàn)，這在一定程度上限制了對(duì)骨腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的深入研究.為了在分子水平對(duì)其進(jìn)行比較研究，獲得具有相同的遺傳背景不同轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞株十分重要.
1材料和方法
1.1材料
成骨肉瘤細(xì)胞系SOSP9607細(xì)胞系由第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍骨腫瘤研究所實(shí)驗(yàn)室建立；RPMI 1640(Gibco， USA)，胰蛋白酶（華美生物工程公司）；胎牛血清與小牛血清（蘭州民海生物制品公司）；細(xì)胞培養(yǎng)瓶與細(xì)胞培養(yǎng)板（Nunc，USA）；基底膜膠（北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部細(xì)胞中心）；侵襲小室（Milipore PI8P01250，USA）；流式細(xì)胞儀（第四軍醫(yī)大學(xué)免疫教研室提供）；BALB/cnu/nu裸小鼠（上海思萊克動(dòng)物試驗(yàn)有限公司）；瓊脂（Spain 蘭州民海生物制品公司）.
1.2方法
1.2.1SOSP9607的克隆化分離培養(yǎng)SOSP9607骨肉瘤細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，用2.5 g/L胰酶消化，倒置顯微鏡下記數(shù)，梯度稀釋至4.6 mL含230個(gè)細(xì)胞（每0.1 mL含5個(gè)細(xì)胞），加入96孔板前36個(gè)孔，每孔0.1 mL.還剩1.0 mL，加培養(yǎng)基至5 mL（每0.1 mL含1個(gè)細(xì)胞）再加入相鄰的36孔，每孔0.1 mL.剩余1.4 mL，再加培養(yǎng)基至終體積2.8 mL，（每0.1 mL含0.5個(gè)細(xì)胞）加入剩余的24孔，每孔0.1 mL.放入培養(yǎng)箱中，在37℃，50 mL/L CO2，飽和濕度環(huán)境下培養(yǎng)5 d，倒置顯微鏡下觀察有單細(xì)胞克隆生長(zhǎng)，補(bǔ)充培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，待長(zhǎng)滿孔底后消化移至24孔板，6孔板，最后移至培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，得到單克隆的細(xì)胞株，分別命名為B7，B12，C2，C11，D12，E10，E12，F(xiàn)6，H4和H9.
1.2.2利用體外侵襲試驗(yàn)進(jìn)行初篩將細(xì)胞培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后，用2.5 g/L胰酶消化，記數(shù)，加入Millipore中，每室2×105個(gè)細(xì)胞數(shù).放入培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)7 h，用棉簽擦去侵襲膜上的瘤細(xì)胞和基底膜膠，甲醇固定30 min，常規(guī)染色記數(shù)膜背面的細(xì)胞數(shù)，將其平均分為4個(gè)象限，每株細(xì)胞3孔，取平均值.
1.2.3原位移植法在裸小鼠體內(nèi)連續(xù)傳代篩選轉(zhuǎn)移細(xì)胞株
1.2.3.1皮下移植瘤模型取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞株，消化，記數(shù)5×106/mL，取0.2 mL（含1×106個(gè)細(xì)胞）注射于3 wk齡裸小鼠股部及頸部皮下，2 wk后開(kāi)始有腫瘤生長(zhǎng)，待長(zhǎng)至1.0 cm×1.5 cm后處死，將其剪成直徑0.5 mm大小瘤塊備用.
1.2.3.2裸小鼠原位移植取3~4 wk齡裸小鼠，手術(shù)前每只裸鼠腹腔注射枸櫞酸芬太尼（國(guó)產(chǎn)）和咪達(dá)唑侖（國(guó)產(chǎn)）混合液，每種藥水用無(wú)菌藥水稀釋1倍后1∶1混合，每只裸鼠0.2 mL.手術(shù)在清潔環(huán)境下進(jìn)行，將裸鼠固定后，乙醇消毒，沿右脛骨表面剪開(kāi)皮膚，皮下，剝離部分脛前肌，暴露脛骨平臺(tái)，用皮試針頭沿45℃方向撬開(kāi)一骨片，將準(zhǔn)備好的腫瘤碎片植入骨髓腔中，蓋好骨片，用尼龍線全層縫合皮下、皮膚.
1.2.3.3體內(nèi)連續(xù)傳代5 wk后觀察到腫瘤生長(zhǎng)，待10 wk后處死全部裸鼠，如有呼吸困難，惡液質(zhì)情況立即處死，取肺組織，肉眼觀察及病理切片有肺轉(zhuǎn)移者，留取肺組織中較大轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)行原代培養(yǎng)并進(jìn)行組織學(xué)觀察，培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)5次傳代后按上述辦法進(jìn)行第二次肺轉(zhuǎn)移試驗(yàn)，共進(jìn)行3個(gè)循環(huán)，第3次（肺轉(zhuǎn)移率已達(dá)100%）從裸鼠肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)原代培養(yǎng)獲得的細(xì)胞為具有高轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞株，相反的，肉眼觀察及肺組織切片觀察3次均不轉(zhuǎn)移的細(xì)胞株為具有低轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞.然后連續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)約30代，分別凍存.
1.2.4細(xì)胞生長(zhǎng)曲線取兩株相同代數(shù)細(xì)胞株培養(yǎng)至對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期，消化計(jì)數(shù)后，調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1×105個(gè)，接種至25 mL細(xì)胞培養(yǎng)瓶，每日任取3瓶細(xì)胞消化后計(jì)數(shù)，取其平均數(shù)，連續(xù)7 d后繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線.
1.2.5H9，E10與母系SOSP9607細(xì)胞染色體的制備染色體制備參照鄂征［5］所介紹的方法.
1.2.6軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)用三蒸水制備濃度為12 g/L的低熔點(diǎn)瓊脂糖液，高壓滅菌后，放于40℃水浴鍋中防止凝固.按1∶1混合12 g/L瓊脂糖液和2×DMEM（含200 mL/L小牛血清），取3 mL上述液體注入直徑3.5 cm的平皿中，冷卻凝固.消化細(xì)胞制成懸液并計(jì)數(shù).按1∶1混合0.7 mg/L瓊脂糖液和2×DMEM（含200 mL/L血清），在上述3 mL液體中加入0.2 mL細(xì)胞懸液（含600個(gè)細(xì)胞）充分混勻，注入底層瓊脂已凝固的平皿，冷卻凝固.置37℃孵箱中培養(yǎng)10~14 d，計(jì)錄克隆形成數(shù).
1.2.7裸鼠實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移率測(cè)定按常規(guī)分別消化培養(yǎng)瓶中的兩株同代克隆細(xì)胞株，制成細(xì)胞懸液，經(jīng)細(xì)胞計(jì)數(shù)后按每鼠1×105細(xì)胞量在無(wú)菌環(huán)境下分別注入兩組裸鼠（每組10只）的尾靜脈.實(shí)驗(yàn)鼠均在接種瘤細(xì)胞后1.5 mo后處死，分別取出兩組裸鼠的肺作全面的病理學(xué)檢查，計(jì)算其轉(zhuǎn)移率.
1.2.8流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期分布收集培養(yǎng)瓶中細(xì)胞，PBS洗滌，用體積分?jǐn)?shù)750 mL/L的冷乙醇固定.將細(xì)胞數(shù)調(diào)整在1×105/mL左右，溴化丙錠染色，上機(jī)檢測(cè).
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)用x±s表示，采用SPSS 10.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，不同細(xì)胞株間比較采用方差分析及SNKq檢驗(yàn)；H9與E10之間軟瓊脂克隆細(xì)胞數(shù)比較采用t′檢驗(yàn)，P
2結(jié)果
2.1體外侵襲試驗(yàn)10個(gè)細(xì)胞株在侵襲試驗(yàn)中穿過(guò)侵襲膜的細(xì)胞數(shù)(x±s)分別為B7: (78±12.4)， H9: (93±15.1)， C2: (221±30.5)， C11: (218±25.5)， D12: (296±20.2)， E10: (406±34.5)， E12: (428±36.5)， H4: (274±16.3)， B12: (398±32.2)， F6: (223±12.2)經(jīng)方差分析及SNKq檢驗(yàn)各細(xì)胞株可分為三組：B7和H9為低侵襲組，E10，E12，B12為高侵襲組，其余的為中侵襲組(n=12， P
2.2體內(nèi)連續(xù)傳代觀察
2.2.1皮下移植瘤2 wk左右皮下均形成移植瘤，經(jīng)組織組織學(xué)觀察及肉眼觀察證明它們?nèi)允浅晒侨饬黾?xì)胞而且未見(jiàn)肺轉(zhuǎn)移（Fig 1）.
2.2.2原位移植瘤原位移植后經(jīng)5 wk左右，原位始見(jiàn)有腫瘤生長(zhǎng)，10 wk左右處死時(shí)，裸鼠活動(dòng)能力下降.H9連續(xù)3代原位移植均不發(fā)生肺轉(zhuǎn)移，E10經(jīng)3次肺轉(zhuǎn)移試驗(yàn)后，肺轉(zhuǎn)移率為100%(Fig 2，3).
2.3細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定兩株細(xì)胞生長(zhǎng)曲線如Fig 4，可見(jiàn)E10體外生長(zhǎng)速度明顯快于H9.
2.4染色體眾數(shù)檢查2個(gè)克隆細(xì)胞株與母系細(xì)胞的染色體眾數(shù)分布特征基本相似，其中染色體在46~60之間的細(xì)胞都近0.8（內(nèi)復(fù)制不計(jì)在內(nèi)）.
2.5軟瓊脂克隆形成試驗(yàn)兩株細(xì)胞株的克隆細(xì)胞數(shù)分別為H9（22±5），E10(98±12)，兩者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
2.6裸鼠實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移率測(cè)定分別經(jīng)尾靜脈給兩組裸鼠注射H9和E10細(xì)胞株，其自發(fā)的轉(zhuǎn)移率分別為10%和100%，且E10的形成結(jié)節(jié)大而密.
2.7流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期經(jīng)流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期分析發(fā)現(xiàn)，E10的S期細(xì)胞比例較多(Tab 1).表1H9，E10和母系SOSP9607的細(xì)胞周期分布（略）
3討論
根據(jù)腫瘤異質(zhì)性理論［1］，在一個(gè)原發(fā)性惡性腫瘤細(xì)胞群中，并不是所有瘤細(xì)胞均具有侵襲和轉(zhuǎn)移能力，僅某些特殊亞群才具有轉(zhuǎn)移潛能，產(chǎn)生轉(zhuǎn)移表型.建立具有穩(wěn)定轉(zhuǎn)移表型的腫瘤亞系，是研究腫瘤轉(zhuǎn)移，如轉(zhuǎn)移的過(guò)程，轉(zhuǎn)移機(jī)制，轉(zhuǎn)移性瘤細(xì)胞和宿主的相互作用，轉(zhuǎn)移和瘤細(xì)胞的粘連分子，癌基因和其產(chǎn)物的關(guān)系，腫瘤轉(zhuǎn)移的干預(yù)治療試驗(yàn)等一系列試驗(yàn)研究所需要的最基本材料. 與轉(zhuǎn)移性細(xì)胞亞系的建立途徑不同，轉(zhuǎn)移性瘤細(xì)胞單克隆細(xì)胞株的建立是從異質(zhì)性母細(xì)胞系群體中分離出來(lái)單個(gè)瘤細(xì)胞，經(jīng)擴(kuò)增形成細(xì)胞株.由于這些克隆細(xì)胞株起源于單個(gè)細(xì)胞，其異質(zhì)性有可能減至最低限度，這非常有利于許多比較性試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和可靠性也最好.近年的許多試驗(yàn)都是以來(lái)源于同一母系的不同轉(zhuǎn)移能力的單克隆細(xì)胞株完成的，如轉(zhuǎn)移相關(guān)基因nm23就是從不同轉(zhuǎn)移能力的B16黑色素細(xì)胞瘤單克隆細(xì)胞株中發(fā)現(xiàn)的［2］.
從各項(xiàng)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)可以看出，E10體外生長(zhǎng)速度明顯較快，細(xì)胞周期測(cè)定S期細(xì)胞較多，裸鼠自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移率接近100%，克隆形成率高.表明E10為轉(zhuǎn)移潛能較高的細(xì)胞株.H9為轉(zhuǎn)移潛能較低的細(xì)胞株.為下一步利用mRNA差異基因顯示技術(shù)［6］ 甚至直接利用蛋白質(zhì)組技術(shù)［7］發(fā)現(xiàn)骨肉瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因及腫瘤標(biāo)志物提供了理想的試驗(yàn)?zāi)Ｐ?
從母系中分離出來(lái)的單細(xì)胞克隆株是否具有穩(wěn)定的表形，目前人們普遍認(rèn)為，轉(zhuǎn)移異質(zhì)性和遺傳不穩(wěn)定性在惡性腫瘤中是普遍存在的.但我們對(duì)SOSP9607的幾個(gè)克隆株傳代觀察發(fā)現(xiàn)這些克隆細(xì)胞株在轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)約30代以內(nèi)，至少在形態(tài)和體外生長(zhǎng)方面并無(wú)明顯差異.不同代數(shù)的克隆細(xì)胞株分批接種裸鼠時(shí)其成瘤和轉(zhuǎn)移率也無(wú)明顯差異.表明這些克隆細(xì)胞株在一定代數(shù)一定培養(yǎng)條件下，其轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)性質(zhì)是比較穩(wěn)定.但為防止克隆細(xì)胞變異，應(yīng)盡量采用克隆后的低代數(shù)進(jìn)行研究.此外還應(yīng)適當(dāng)傳代后在對(duì)其生物學(xué)性質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，以了解這些克隆細(xì)胞是否發(fā)生變異，或是再進(jìn)行新一輪的亞克隆分離.
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1.(2013·海淀模擬)2012年諾貝爾生理學(xué)獎(jiǎng)獲得者發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)人體表皮細(xì)胞使之具有胚胎干細(xì)胞的活動(dòng)特征，且這些細(xì)胞可以轉(zhuǎn)變?yōu)樾募〖?xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞。下列與此有關(guān)的說(shuō)法，不正確的是()
A.該研究說(shuō)明細(xì)胞分化是可以逆轉(zhuǎn)的
B.人體表皮細(xì)胞的基因發(fā)生了突變
C.誘導(dǎo)后的細(xì)胞具有分裂和分化能力
D.該研究可為治療心血管絕癥提供幫助
答案 B
解析 表皮細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)后具有了胚胎干細(xì)胞的活動(dòng)特征，胚胎干細(xì)胞的分化程度較低，這說(shuō)明細(xì)胞分化可以逆轉(zhuǎn);在該過(guò)程中，細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)并未發(fā)生改變;誘導(dǎo)形成的胚胎干細(xì)胞能夠分裂分化為心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞，因此該研究可為治療心血管疾病提供幫助。
2.脊椎動(dòng)物胚胎發(fā)育中產(chǎn)生了過(guò)量的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元，它們競(jìng)爭(zhēng)肌細(xì)胞所分泌的神經(jīng)生長(zhǎng)因子，只有接受了足夠量神經(jīng)生長(zhǎng)因子的神經(jīng)元才能生存，并與靶細(xì)胞建立連接，其他的則發(fā)生凋亡。下列敘述正確的是()
A.脊椎動(dòng)物細(xì)胞凋亡僅發(fā)生在胚胎發(fā)育時(shí)期
B.一個(gè)存活的神經(jīng)元只與一個(gè)靶細(xì)胞建立連接
C.神經(jīng)元凋亡是不受環(huán)境影響的細(xì)胞自動(dòng)死亡
D.神經(jīng)元凋亡是由基因控制的編程性死亡
答案 D
解析 細(xì)胞凋亡不僅發(fā)生在胚胎期，也發(fā)生在生物體其他的生命過(guò)程中;一個(gè)神經(jīng)元通過(guò)它的軸突末梢可以與一個(gè)或多個(gè)神經(jīng)元建立突觸聯(lián)系;從題中信息可知，神經(jīng)元的凋亡與神經(jīng)生長(zhǎng)因子有關(guān)，說(shuō)明神經(jīng)元凋亡受環(huán)境影響;神經(jīng)元凋亡是受基因所控制的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過(guò)程，是基因控制的編程性死亡。
3.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤為惡性腫瘤，其發(fā)病與RB基因有關(guān)。RB基因編碼的蛋白質(zhì)稱為RB蛋白，分布于核內(nèi)，能抑制細(xì)胞增殖。正常人體細(xì)胞中含有一對(duì)RB基因，當(dāng)兩個(gè)RB基因同時(shí)突變產(chǎn)生突變蛋白時(shí)，會(huì)發(fā)生視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。下列敘述正確的是()
A.上述RB基因發(fā)生的突變屬于顯性突變
B.RB基因?yàn)橐职┗?，能抑制?xì)胞癌變
C.突變蛋白的產(chǎn)生體現(xiàn)了細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)
D.突變蛋白可以延長(zhǎng)細(xì)胞周期
答案 B
解析 根據(jù)“當(dāng)兩個(gè)RB基因同時(shí)突變產(chǎn)生突變蛋白時(shí)，會(huì)發(fā)生視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤”可知，RB基因發(fā)生的突變屬于隱性突變;因?yàn)镽B基因編碼的蛋白質(zhì)能抑制細(xì)胞增殖，所以RB基因?yàn)橐职┗?細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，而RB基因突變過(guò)程中遺傳信息發(fā)生了改變;RB蛋白能抑制細(xì)胞增殖，可以延長(zhǎng)細(xì)胞周期，而突變蛋白形成后產(chǎn)生癌細(xì)胞，其細(xì)胞周期變短。
4.下列關(guān)于細(xì)胞衰老、凋亡與壞死的敘述，正確的是()
A.衰老細(xì)胞的體積和細(xì)胞核體積都縮小
B.青蛙發(fā)育過(guò)程中尾的消失屬于細(xì)胞壞死現(xiàn)象
C.細(xì)胞凋亡的根本原因是病原體感染
D.細(xì)胞衰老與凋亡是細(xì)胞正常的生理過(guò)程
答案 D
解析 衰老細(xì)胞的體積縮小，細(xì)胞核體積增大;青蛙發(fā)育過(guò)程中尾的消失屬于細(xì)胞凋亡現(xiàn)象;細(xì)胞凋亡是受基因控制的編程性死亡過(guò)程。
5.下列有關(guān)細(xì)胞分化、衰老及凋亡的敘述，不正確的是()
A.細(xì)胞分化能使細(xì)胞中細(xì)胞器的種類和數(shù)量發(fā)生改變
B.衰老細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)線粒體減少、酶活性降低及細(xì)胞核變大等現(xiàn)象
C.細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎期，細(xì)胞衰老與凋亡發(fā)生在老年期
D.被病原體感染的細(xì)胞的清除是通過(guò)細(xì)胞凋亡完成的
答案 C
解析 細(xì)胞分化是生物個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程。細(xì)胞分化使細(xì)胞中細(xì)胞器的種類和數(shù)量發(fā)生改變。細(xì)胞的衰老與凋亡發(fā)生在生物個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育的各個(gè)時(shí)期。
6.為探究物質(zhì)P抑制癌細(xì)胞增殖的效應(yīng)，研究人員使用不同濃度的物質(zhì)P處理人的離體肝癌細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()
A.隨著物質(zhì)P濃度的增加，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用越明顯，但與處理時(shí)間無(wú)關(guān)
B.隨著物質(zhì)P處理時(shí)間的延長(zhǎng)，抑制癌細(xì)胞增殖的作用越明顯，但與濃度無(wú)關(guān)
C.物質(zhì)P對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用機(jī)制，可能與調(diào)控細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)有關(guān)
D.通過(guò)本實(shí)驗(yàn)可以得出結(jié)論，物質(zhì)P抑制癌細(xì)胞增殖的最適濃度為1.00 g/L
答案 C
解析 分析圖中曲線可知，物質(zhì)P的濃度和處理時(shí)間影響抑制率，A、B錯(cuò)誤;從實(shí)驗(yàn)的結(jié)果看，該藥物可以有效地抑制癌細(xì)胞增殖，其作用機(jī)理很可能是調(diào)控了癌細(xì)胞內(nèi)凋亡基因的表達(dá)，使癌細(xì)胞進(jìn)入編程性死亡的程序，C正確;本實(shí)驗(yàn)只是設(shè)置了物質(zhì)P的部分濃度，雖然在1.00 g/L時(shí)抑制效果較另兩組好，但不能確定該濃度為最適濃度，D錯(cuò)誤。
7. 2012年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了在細(xì)胞核重編程研究領(lǐng)域作出杰出貢獻(xiàn)的英國(guó)和日本的兩位生物學(xué)家。所謂“細(xì)胞核重編程”即將人類成熟的體細(xì)胞重新誘導(dǎo)回干細(xì)胞狀態(tài)，它們就有再分化形成多種類型的細(xì)胞的可能，可應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()
A.細(xì)胞核重編程與細(xì)胞內(nèi)基因的選擇性表達(dá)密切相關(guān)
B.該項(xiàng)研究為臨床上解決器官移植的排斥反應(yīng)帶來(lái)希望
C.“動(dòng)物細(xì)胞的分化是一個(gè)不可逆的過(guò)程”將可能被改寫
D.他們的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了動(dòng)物細(xì)胞的全能性
答案 D
解析 根據(jù)題意，細(xì)胞核重編程是指將人類成熟的體細(xì)胞重新誘導(dǎo)回干細(xì)胞狀態(tài)，該過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)基因的選擇性表達(dá)有密切關(guān)系，A正確;臨床醫(yī)學(xué)上利用該研究可以解決器官移植中的排斥反應(yīng)問(wèn)題，B正確;利用細(xì)胞核重編程技術(shù)可以使已經(jīng)分化了的動(dòng)物細(xì)胞重新回到干細(xì)胞狀態(tài)，C正確;干細(xì)胞可以分化成多種類型的細(xì)胞，體現(xiàn)了干細(xì)胞發(fā)育的全能性，D錯(cuò)誤。
8.科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)，人與其他哺乳動(dòng)物一樣，體內(nèi)也存在一種被稱為“ISL1”的心臟祖細(xì)胞，它可以分化為心肌、血管等特定類型的細(xì)胞。下列有關(guān)心臟祖細(xì)胞的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是()
A.心臟祖細(xì)胞分化程度比心肌細(xì)胞的低
B.心臟祖細(xì)胞的分化性能比胚胎干細(xì)胞的低
C.心臟祖細(xì)胞與心肌細(xì)胞的核遺傳信息相同
D.心臟祖細(xì)胞與造血干細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)不同的直接原因是mRNA不同
答案 D
解析 心肌細(xì)胞是由心臟祖細(xì)胞分化而來(lái)的，可見(jiàn)心臟祖細(xì)胞的分化程度比心肌細(xì)胞的低，A項(xiàng)正確。胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，故心臟祖細(xì)胞的分化性能比胚胎干細(xì)胞的低，B項(xiàng)正確。同一個(gè)體的不同體細(xì)胞都是由同一個(gè)細(xì)胞(受精卵)分裂、分化形成的，故含有相同的遺傳信息，C項(xiàng)正確。心臟祖細(xì)胞與造血干細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)不同的直接原因是蛋白質(zhì)不同，根本原因才是mRNA不同，D項(xiàng)錯(cuò)誤。
9.下列有關(guān)細(xì)胞生命歷程的說(shuō)法，正確的是()
A.進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞中一定存在同源染色體
B.細(xì)胞凋亡受基因控制，細(xì)胞癌變不受基因控制
C.白化病患者由于細(xì)胞衰老，酪氨酸酶活性降低而頭發(fā)變白
D.將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成植株的過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性
答案 D
解析 單倍體生物進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞不一定含有同源染色體，如含有一個(gè)染色體組的單倍體;細(xì)胞凋亡受基因控制，細(xì)胞癌變是由于原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變?cè)斐傻?，也受基因控?白化病產(chǎn)生的根本原因是基因突變，頭發(fā)變白是由于其體內(nèi)缺少酪氨酸酶，最終轉(zhuǎn)化成的黑色素少;將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培育成完整植株的過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性。
10.如圖為人體細(xì)胞的分裂、分化、衰老和死亡過(guò)程的示意圖，圖中①～⑥為各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞，a～c表示細(xì)胞所進(jìn)行的生理過(guò)程。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是()
A.與①相比，②的表面積與體積的比值增大，與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的能力增強(qiáng)
B.⑤與⑥的基因型相同，蛋白質(zhì)的種類也相同
C.若⑤⑥已失去分裂能力，則其細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)镈NARNA蛋白質(zhì)
D.細(xì)胞衰老與死亡就會(huì)引起個(gè)體衰老與死亡
答案 C
解析?、诒娶俚捏w積大，細(xì)胞體積越大，細(xì)胞的表面積與體積之比越小，與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的能力越弱;⑤和⑥細(xì)胞是由同一細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成的，它們所含有的遺傳物質(zhì)相同，因此基因型相同，但由于這兩種細(xì)胞是細(xì)胞分化形成的，它們基因表達(dá)的情況有差異，因此，蛋白質(zhì)種類有差異;若⑤⑥細(xì)胞失去分裂能力，則細(xì)胞中沒(méi)有DNA復(fù)制過(guò)程，但有基因的表達(dá)過(guò)程，遺傳信息流動(dòng)的方向?yàn)镈NARNA蛋白質(zhì);多細(xì)胞生物中細(xì)胞的衰老與死亡和個(gè)體的衰老與死亡不一定是同步的。
11.下列關(guān)于細(xì)胞生命活動(dòng)的敘述，不正確的是()
A.不同細(xì)胞中處于關(guān)閉狀態(tài)的基因一般不同
B.細(xì)胞普遍衰老與個(gè)體衰老存在因果關(guān)系
C.通過(guò)細(xì)胞凋亡可完成細(xì)胞的自然更新
D.霉變的食品易導(dǎo)致基因突變而產(chǎn)生原癌基因
答案 D
解析 細(xì)胞分化與基因的選擇性表達(dá)有關(guān)，因此不同的細(xì)胞處于關(guān)閉狀態(tài)的基因一般不同;細(xì)胞的普遍衰老引起個(gè)體的衰老;通過(guò)細(xì)胞凋亡可完成細(xì)胞的自然更新;原癌基因是細(xì)胞中原本就含有的，不是由基因突變產(chǎn)生的。
12.正常干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞都具有增殖、轉(zhuǎn)移的能力，但二者在細(xì)胞增殖、分化潛能和細(xì)胞遷移等行為上又存在明顯的差異。下列相關(guān)敘述中，合理的是()
A.正常干細(xì)胞的增殖過(guò)程受基因調(diào)控，腫瘤干細(xì)胞的增殖過(guò)程不受基因調(diào)控
B.正常干細(xì)胞只能遷移到特定組織，而腫瘤干細(xì)胞可遷移到很多部位
C.二者都失去了正常分化的能力
D.二者的遺傳信息都沒(méi)有發(fā)生改變
答案 B
解析 正常干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞的增殖都受基因調(diào)控，A項(xiàng)錯(cuò)誤;正常干細(xì)胞只能遷移到特定組織并分化為特定的細(xì)胞，而腫瘤干細(xì)胞不受限制，易擴(kuò)散轉(zhuǎn)移，B項(xiàng)正確;正常干細(xì)胞具有分化能力，腫瘤干細(xì)胞則不能完成正常的分化，C項(xiàng)錯(cuò)誤;腫瘤干細(xì)胞的遺傳信息發(fā)生了改變，D項(xiàng)錯(cuò)誤。
13.變形蟲和草履蟲均為單細(xì)胞真核生物，二者在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上存在較大差異(設(shè)為甲組);同一高等植物上的葉肉細(xì)胞和根毛細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上也存在較大差異(設(shè)為乙組)。下列關(guān)于兩組不同細(xì)胞間存在較大差異的根本原因的敘述中，正確的是()
A.兩組均是因?yàn)檫z傳物質(zhì)不同
B.兩組均是因?yàn)樘幱诒磉_(dá)狀態(tài)的基因不同
C.甲組是因?yàn)檫z傳物質(zhì)不同，乙組是因?yàn)樘幱诒磉_(dá)狀態(tài)的基因不同
D.甲組是因?yàn)樘幱诒磉_(dá)狀態(tài)的基因不同，乙組是因?yàn)檫z傳物質(zhì)不同
答案 C
解析 變形蟲和草履蟲屬于兩種生物，二者的遺傳物質(zhì)不同;同一植株上的葉肉細(xì)胞和根毛細(xì)胞是由一個(gè)受精卵經(jīng)有絲分裂、分化得到的，二者的遺傳物質(zhì)相同，但處于表達(dá)狀態(tài)的基因存在差異。
14.細(xì)胞的生命歷程與人的生命歷程相似，都可分為生長(zhǎng)、發(fā)育、衰老和死亡等階段，下列關(guān)于細(xì)胞生命歷程的敘述，正確的是()
A.細(xì)胞衰老的過(guò)程與基因無(wú)關(guān)
B.只要不接觸致癌因子，就不會(huì)發(fā)生細(xì)胞癌變
C.經(jīng)過(guò)分化的細(xì)胞一定不具有細(xì)胞分裂能力
D.效應(yīng)T細(xì)胞使靶細(xì)胞死亡，屬于細(xì)胞凋亡
答案 D
解析 細(xì)胞分裂、細(xì)胞分化、細(xì)胞衰老、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞癌變都受基因調(diào)控，A項(xiàng)錯(cuò)誤;細(xì)胞癌變的內(nèi)因是原癌基因和抑癌基因突變，外因是致癌因子誘導(dǎo)，不接觸致癌因子的細(xì)胞也可能會(huì)發(fā)生癌變，B項(xiàng)錯(cuò)誤;經(jīng)過(guò)分化的細(xì)胞不一定就不具有分裂能力，如B細(xì)胞是經(jīng)過(guò)分化的細(xì)胞，但它還能增殖、分化，C項(xiàng)錯(cuò)誤;被病原體感染的細(xì)胞的清除是通過(guò)細(xì)胞凋亡完成的，D項(xiàng)正確。
15.脊椎動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)在發(fā)育過(guò)程中，約有50%的細(xì)胞凋亡。發(fā)育中神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量的調(diào)節(jié)示意圖如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()
A.在發(fā)育過(guò)程中產(chǎn)生的神經(jīng)細(xì)胞一般是過(guò)量的
B.神經(jīng)細(xì)胞能夠存活下來(lái)可能與獲得足夠的生長(zhǎng)因子有關(guān)
C.細(xì)胞凋亡能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞的數(shù)量
D.神經(jīng)細(xì)胞的死亡與生長(zhǎng)因子的數(shù)量有關(guān)，與基因表達(dá)無(wú)關(guān)
答案 D
解析 由題意可知，正常存活下來(lái)的神經(jīng)細(xì)胞只有一半，因此發(fā)育過(guò)程中產(chǎn)生的神經(jīng)細(xì)胞一般是過(guò)量的。細(xì)胞凋亡是基因決定的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過(guò)程，因此與基因的表達(dá)有關(guān)。
16.某科研小組開(kāi)展了人白細(xì)胞介素18(IL18)對(duì)核輻射誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞凋亡的抑制作用的研究。
實(shí)驗(yàn)原理：機(jī)體的免疫系統(tǒng)對(duì)核輻射損傷很敏感，主要表現(xiàn)在核輻射會(huì)誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡。
實(shí)驗(yàn)步驟：
①選取若干實(shí)驗(yàn)小鼠，隨機(jī)均分成甲、乙、丙三組;
②甲組無(wú)輻射損傷;乙組輻射損傷(60Co照射，下同);丙組先輻射損傷，1天后注射IL18。
③14天后分別取各組小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)了0 h、12 h、24 h、48 h后，檢測(cè)并計(jì)算細(xì)胞凋亡相對(duì)值。
(1)脾屬于機(jī)體免疫系統(tǒng)的____________，IL18是一種淋巴因子，由________細(xì)胞分泌;淋巴因子與____________都屬于免疫活性物質(zhì)。
(2)細(xì)胞凋亡是由遺傳機(jī)制決定的________________死亡，與細(xì)胞凋亡直接相關(guān)的細(xì)胞器是________。
(3)設(shè)置甲、乙兩組的目的是探究有無(wú)核輻射對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。設(shè)置乙、丙兩組的目的是__________________________________。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表。
(
4)科研小組還設(shè)置了丁組實(shí)驗(yàn)，方法是先注射IL18,3天后進(jìn)行輻射損傷，14天后的實(shí)驗(yàn)操作同前三組，與丙組相比，設(shè)置丁組的目的是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案 (1)免疫器官 T 抗體(或溶菌酶) (2)編程性(程序性) 溶酶體 (3)探究有無(wú)注射IL18對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
表格如下：
組別 細(xì)胞凋亡相對(duì)值0 h 12 h 24 h 48 h 甲 乙 丙 (4)探究核輻射前、后注射IL18對(duì)細(xì)胞凋亡的影響
解析 (1)免疫系統(tǒng)是由免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫活性物質(zhì)組成的，脾屬于免疫器官，而白細(xì)胞介素是由T細(xì)胞分泌的一種淋巴因子，白細(xì)胞介素和抗體都屬于免疫活性物質(zhì)。(2)細(xì)胞凋亡是由基因所決定的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過(guò)程，與其直接有關(guān)的細(xì)胞器是溶酶體。(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)所遵循的單一變量原則，可以看出乙丙組對(duì)照，自變量是有無(wú)注射IL18，從而探究有無(wú)注射IL18對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。(4)設(shè)計(jì)丁組實(shí)驗(yàn)和丙組形成對(duì)照，進(jìn)一步探究核輻射前、后注射IL18對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。
17.如圖表示造血干細(xì)胞的發(fā)育途徑，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。
(1)造血干細(xì)胞A進(jìn)行自我更新的過(guò)程需要進(jìn)行________和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成。
(2)與細(xì)胞C凋亡有關(guān)的細(xì)胞器主要是________，細(xì)胞D和細(xì)胞E不同的根本原因是______________________。
(3)在免疫的三道防線中，細(xì)胞E參與________________防線。在細(xì)胞D參與的免疫過(guò)程中，細(xì)胞D由__________________________分化而來(lái)，細(xì)胞E在此免疫過(guò)程中的作用是________________________。
關(guān)鍵詞：頭孢類抗生素；耐藥性；合理用藥
抗生素不合理使用容易引發(fā)耐藥性升高，耐藥性（drug resistance）又稱抗藥性，指微生物、寄生蟲以及腫瘤細(xì)胞對(duì)于化療藥物作用的耐受性，耐藥性一旦產(chǎn)生，藥物的化療作用就明顯下降。因此臨床應(yīng)該嚴(yán)格監(jiān)控抗生素類藥物的使用[1]。我們隨機(jī)選取我院2010年1月~2012年1月門急診處方200張，統(tǒng)計(jì)其中應(yīng)用抗生素藥物和頭孢類抗生素藥物的處方，對(duì)頭孢類抗生素使用特點(diǎn)進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1一般資料隨機(jī)選取我院2010年1月~2012年1月門急診處方200張，統(tǒng)計(jì)其中應(yīng)用抗生素藥物和頭孢類抗生素藥物的處方，對(duì)頭孢類抗生素使用特點(diǎn)進(jìn)行分析。
1.2 方法根據(jù)這些處方上的信息對(duì)我院門急診抗生素使用比例和合理用藥進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并將統(tǒng)計(jì)結(jié)果和文獻(xiàn)資料的信息進(jìn)行對(duì)比。收集信息主要通過(guò)走訪調(diào)查，調(diào)查對(duì)象主要包括醫(yī)生、護(hù)士、藥房工作人員。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用Microsoft Office Excel工具對(duì)這些統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸類分析。
2結(jié)果
2.1 200例處方單基本信息我們的調(diào)查結(jié)果顯示200張?zhí)幏街校?7張為抗生素處方占48.50%，89張為頭孢類抗生素占44.50%。89張頭孢類抗生素處方中，30張為口服類抗生素占33.71%，59張為注射類抗生素占66.29%。89張頭孢類抗生素處方中，單用抗生素為78張占87.64%，二聯(lián)抗生素為8張占8.99%，3張為三聯(lián)抗生素占3.37%。89張頭孢類抗生素處方中，一代頭孢10張占11.24%，二代頭孢19張占21.35%，三代頭孢57張占64.04%，四代頭孢3張占3.37%。
2.2 抗生素使用頻率我們的調(diào)查發(fā)現(xiàn)89張頭孢類抗生素處方單中使用頻率由高到低依次為：頭孢曲松注射劑>頭孢克洛分散片>頭孢他啶注射劑>頭孢哌酮舒巴坦注射劑>頭孢呋辛酯膠囊>頭孢克肟顆粒>頭孢克肟片>頭孢噻肟注射劑>頭孢孟多酯>頭孢唑啉注射劑,見(jiàn)表1。
2.3 使用頭孢類抗生素治療的疾病類型我們的調(diào)查結(jié)果顯示89張頭孢類抗生素治療的疾病由高到低依次為上呼吸道感染>支氣管炎癥>腹瀉病>其他，見(jiàn)表2。
3討論
頭孢類抗生素是指分子中含有頭孢烯的半合成抗生素，屬于β－內(nèi)酰胺類抗生素，是β-內(nèi)酰胺類抗生素中的7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)的衍生物，因此它們具有相似的殺菌機(jī)制。頭孢類抗生素可破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁，并在繁殖期殺菌。對(duì)細(xì)菌的選擇作用強(qiáng)，而對(duì)人幾乎沒(méi)有毒性，具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)、耐青霉素酶、過(guò)敏反應(yīng)較青霉素類少見(jiàn)等優(yōu)點(diǎn)。所以是一類高效、低毒、臨床廣泛應(yīng)用的重要抗生素[2]。
根據(jù)其抗菌特點(diǎn)，一般將頭孢類抗生素分為四類：一代，較早開(kāi)發(fā)，抗菌活性較強(qiáng)，抗菌譜較窄，抗革蘭氏陽(yáng)性菌作用優(yōu)于革蘭氏陰性菌[3]；二代，除保留了第一代的對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的作用外,由于它們對(duì)革蘭氏陰性桿菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶較第一代穩(wěn)定,抗菌譜也較第一代廣,所以顯著地?cái)U(kuò)大和提高了對(duì)革蘭氏陰性桿菌作用；三代，對(duì)多種β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌均有顯著的抗菌活性。與第一、二代相比，其抗菌譜更廣，抗菌活性更強(qiáng)。特別對(duì)革蘭氏陰性桿菌的抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)；四代，抗菌譜極廣，對(duì)多種革蘭氏陽(yáng)性菌、陰性菌都有很強(qiáng)的抗菌作用。
我們的調(diào)查結(jié)果顯示三代頭孢抗生素的使用次數(shù)最多，其中以頭孢曲松注射劑使用頻率最高。由此可見(jiàn)，我院門急診普遍用藥起點(diǎn)較高，對(duì)一代、二代抗生素使用頻率較少。
綜上所述，頭孢類抗生素是臨床常用的治療藥物，如果使用不當(dāng)或?yàn)E用容易引發(fā)耐藥性升高，因此臨床應(yīng)該及時(shí)監(jiān)控其使用情況，對(duì)其使用進(jìn)行合理指導(dǎo)。
參考文獻(xiàn)：
[1]朱三華.抗生素藥物引起惡心嘔吐的調(diào)查分析[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2013,12(11):73-74.
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《組成細(xì)胞的分子》是人教版高中六冊(cè)課本中必修第一冊(cè)《普通高中課程標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)教科書生物1（必修）分子與細(xì)胞》第二章的課程內(nèi)容，這一章節(jié)在高中生物課程的學(xué)習(xí)中有著及其重要的作用，該章是學(xué)習(xí)第一冊(cè)教材其它章節(jié)、其它必修模塊以及選修模塊的知識(shí)基礎(chǔ)，是培養(yǎng)學(xué)生探究、繪圖、實(shí)驗(yàn)等技能的基礎(chǔ)。所以研究如何上好這一章的內(nèi)容對(duì)整個(gè)高中生物課程教學(xué)都有著極其重要的作用。
一、教學(xué)課時(shí)安排策略
《組成細(xì)胞的分子》這一章的內(nèi)容主要分為細(xì)胞中的元素和化合物、生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者─蛋白質(zhì)、遺傳信息的攜帶者─核酸、細(xì)胞中的糖類和脂質(zhì)、細(xì)胞中的無(wú)機(jī)物這五個(gè)小節(jié)。建議教師每一節(jié)課對(duì)應(yīng)一課時(shí)來(lái)進(jìn)行講解，再加上其中兩節(jié)有實(shí)驗(yàn)課，每節(jié)實(shí)驗(yàn)課一課時(shí)，則這章的內(nèi)容至少要七課時(shí)來(lái)完成教學(xué)計(jì)劃。為了循序?qū)W生由易到難的認(rèn)知規(guī)律，建議把第一節(jié)《細(xì)胞中的元素和化合物》和最后一節(jié)《細(xì)胞中的無(wú)機(jī)物》放在一起學(xué)習(xí)[1]。這樣的課時(shí)劃分，有利于讓學(xué)生有針對(duì)性的掌握本章每一節(jié)的具體內(nèi)容，并且能夠突出本章教材的重點(diǎn)和難點(diǎn)，能夠讓教師有側(cè)重點(diǎn)地去教學(xué)，讓學(xué)生能夠有側(cè)重點(diǎn)的學(xué)習(xí)和記憶教材內(nèi)容，從而能夠提高生物課堂教學(xué)的有效率和學(xué)生學(xué)習(xí)的有效率。
二、聯(lián)系生活，創(chuàng)設(shè)學(xué)習(xí)情境
在教學(xué)過(guò)程中，教師要盡可能地創(chuàng)造條件，讓學(xué)生通過(guò)自主的活動(dòng)，主動(dòng)去觀察、去探究、去學(xué)習(xí)。生物是一門與實(shí)際生活聯(lián)系緊密的學(xué)科，教師可以通過(guò)聯(lián)系生活創(chuàng)設(shè)學(xué)習(xí)情境，讓學(xué)生在輕松、愉悅的學(xué)習(xí)氛圍中去學(xué)習(xí)知識(shí)、基本技能以及真正領(lǐng)悟科學(xué)的思想和精神[2]。《組成細(xì)胞的分子》這一章的內(nèi)容與實(shí)際生活聯(lián)系尤為緊密，教師可以根據(jù)生活中的實(shí)際例子，來(lái)創(chuàng)設(shè)問(wèn)題情境，讓學(xué)生既能夠激發(fā)學(xué)習(xí)興趣，又能夠加強(qiáng)學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，還能不斷提高學(xué)生的實(shí)際應(yīng)用能力。例如教師可以通過(guò)“大頭嬰兒”的示例作為導(dǎo)入來(lái)引起學(xué)生對(duì)《生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者─蛋白質(zhì)》這一節(jié)課的學(xué)習(xí)興趣，然后教師可以讓學(xué)生舉含蛋白質(zhì)食品的例子等，讓學(xué)生在接下來(lái)的學(xué)習(xí)中集中注意力。在學(xué)習(xí)第3節(jié)《遺傳信息的攜帶者─核酸》時(shí)，教師可以從學(xué)生比較感興趣的DNA技術(shù)在案件偵破中的應(yīng)用作為導(dǎo)入，并讓學(xué)生自主地圍繞DNA討論幾個(gè)問(wèn)題，把學(xué)生從思維熱身中引入核酸內(nèi)容的學(xué)習(xí)中?！都?xì)胞中的糖類和脂質(zhì)》這一節(jié)內(nèi)容更是與學(xué)生的生活和身體健康密切相關(guān)，教師要善于利用這一特點(diǎn)，結(jié)合學(xué)生的實(shí)際創(chuàng)設(shè)情境。一提到吃，學(xué)生肯定很感興趣，教師就可以利用“吃”來(lái)引入教學(xué)內(nèi)容，可以通過(guò)“運(yùn)動(dòng)會(huì)時(shí)，可以為運(yùn)動(dòng)員們準(zhǔn)備哪些能夠快速補(bǔ)充能量的食物”來(lái)讓學(xué)生認(rèn)識(shí)到糖能為人提供能量，從而過(guò)渡到糖類的學(xué)習(xí)中。通過(guò)這樣的方式能夠緊緊抓住學(xué)生的注意力，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。
三、不斷完善教學(xué)方式
受傳統(tǒng)教育的影響，我國(guó)高中教學(xué)的教學(xué)方式一般都是教師講、學(xué)生聽(tīng)的模式，這樣的教學(xué)模式嚴(yán)重忽視了學(xué)生的主體地位，并且隨著新課改的不斷推進(jìn)，傳統(tǒng)教學(xué)模式的弊端已逐漸顯露出來(lái)，這就要求教師從傳統(tǒng)教學(xué)模式的框架下走出來(lái)，不斷研究并采用國(guó)內(nèi)外有效的教學(xué)方式，不斷完善生物課堂教學(xué)方式。例如小組合作模式，生物教學(xué)內(nèi)容中的實(shí)驗(yàn)部分是最適合運(yùn)用小組合作學(xué)習(xí)模式的教學(xué)內(nèi)容。例如“觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”的實(shí)驗(yàn)，這個(gè)實(shí)驗(yàn)是本節(jié)教學(xué)內(nèi)容的關(guān)鍵，是本章兩個(gè)重要實(shí)驗(yàn)之一。教師可以根據(jù)學(xué)生的性別、學(xué)習(xí)能力、實(shí)驗(yàn)技能、興趣愛(ài)好等情況遵循“組內(nèi)異質(zhì)、組間同質(zhì)”的原則進(jìn)行合理分配劃分小組，分小組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究并討論。這樣既能夠讓學(xué)生自己動(dòng)手實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)知識(shí)，又能夠讓學(xué)生在小組合作中相互學(xué)習(xí)、相互促進(jìn)，不斷提高生物學(xué)習(xí)水平。
四、運(yùn)用多媒體技術(shù)
生物教學(xué)內(nèi)容中有很多復(fù)雜的生命現(xiàn)象或者生化反應(yīng)，代謝途徑等等，如果教師只是用語(yǔ)言去描述，學(xué)生接受起來(lái)就有所困難[3]。但是多媒體技術(shù)能夠把聲音、文字、視頻等進(jìn)行有機(jī)結(jié)合，既形象生動(dòng)、又直觀，讓學(xué)生能夠在視聽(tīng)享受中加深學(xué)生對(duì)教學(xué)內(nèi)容的理解，讓學(xué)生能夠自主的在頭腦中構(gòu)建相應(yīng)的理論模型和知識(shí)結(jié)構(gòu)，這樣學(xué)生也容易掌握教學(xué)中的難點(diǎn)和重點(diǎn)。例如在學(xué)習(xí)《生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者─蛋白質(zhì)》這一節(jié)的內(nèi)容時(shí)，教師可以用多媒體技術(shù)展示氨基酸組成蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次，通過(guò)多媒體來(lái)展示幾種氨基酸的結(jié)構(gòu)，讓學(xué)生自己推導(dǎo)氨基酸的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式，使抽象的內(nèi)容變得形象生動(dòng)，既能夠讓學(xué)生印象深刻，又能夠構(gòu)建活潑開(kāi)放的課堂氛圍。
結(jié)束語(yǔ)：
隨著新課改的不斷推進(jìn)，很多新的教學(xué)模式和教學(xué)理念正在被廣大教師理解并且運(yùn)用，已經(jīng)在慢慢影響課堂教學(xué)實(shí)踐，并取得了一定的成果。但是我們也能發(fā)現(xiàn)，新理念、新教學(xué)模式、新教學(xué)策略在課堂教學(xué)的落實(shí)方面還存在著不足。本文上述提到的《組成細(xì)胞的分子》這一章的教學(xué)策略并不是唯一的、固定的，這就需要教師在教學(xué)過(guò)程中不斷總結(jié)分析并不斷完善，在教學(xué)實(shí)踐中不斷探索適合自身學(xué)科特點(diǎn)的教學(xué)策略。
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關(guān)鍵詞：保險(xiǎn)市場(chǎng)；服務(wù)體系；外部環(huán)境
從保險(xiǎn)業(yè)的發(fā)展整體趨勢(shì)來(lái)看，在保險(xiǎn)產(chǎn)品與費(fèi)率同質(zhì)性逐步加強(qiáng)的情況下，保險(xiǎn)服務(wù)將成為保險(xiǎn)市場(chǎng)新的競(jìng)爭(zhēng)焦點(diǎn)。保險(xiǎn)公司必須從展業(yè)、投保、承保、理賠、防災(zāi)防損等各個(gè)環(huán)節(jié)為客戶提供差異化服務(wù)，從而得到客戶的信任和依賴，最終創(chuàng)造企業(yè)價(jià)值，這正是保險(xiǎn)服務(wù)體系建設(shè)的真正目標(biāo)與歸宿之所在。農(nóng)村保險(xiǎn)是農(nóng)村金融對(duì)“三農(nóng)”支持保護(hù)體系的重要組成部分。農(nóng)村保險(xiǎn)服務(wù)體系的構(gòu)建對(duì)于促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)的發(fā)展以及保險(xiǎn)公司自身成長(zhǎng)都顯得尤為重要。
一、安徽省農(nóng)村保險(xiǎn)市場(chǎng)發(fā)展現(xiàn)狀
（一）農(nóng)村保險(xiǎn)市場(chǎng)發(fā)展加快
安徽省是一個(gè)典型的農(nóng)村人口大省，總?cè)丝?516萬(wàn)人，其中農(nóng)村人口5147萬(wàn)人，占比78.99%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于全國(guó)平均水平。2008年，全省共實(shí)現(xiàn)政策性農(nóng)業(yè)保險(xiǎn)保費(fèi)收入3.06億元，農(nóng)村人身險(xiǎn)保費(fèi)收入68.39億元，同比增長(zhǎng)48.18%，進(jìn)一步提高了農(nóng)村人群的保障水平。
（二）農(nóng)村保險(xiǎn)服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)初步形成規(guī)模
目前安徽省共有1800多家縣、鄉(xiāng)級(jí)保險(xiǎn)機(jī)構(gòu)。以中國(guó)人壽巢湖分公司為例，目前已經(jīng)在全市120個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)建立了50多個(gè)農(nóng)村營(yíng)銷服務(wù)部，組建了以農(nóng)村營(yíng)銷服務(wù)部發(fā)展為依托，以駐村業(yè)務(wù)員服務(wù)為主體，以地方政府、鄉(xiāng)鎮(zhèn)密切合作，以行政村為單位，建立基本完備的中國(guó)人壽農(nóng)村市場(chǎng)終端服務(wù)體系。
（三）政策性農(nóng)村保險(xiǎn)發(fā)展較快
1、政策性農(nóng)業(yè)保險(xiǎn)成果顯著。安徽省第一產(chǎn)業(yè)占GDP的比重近幾年一直為近20%，作為農(nóng)業(yè)大省必須重視農(nóng)業(yè)保險(xiǎn)。2009年中央財(cái)政補(bǔ)貼的9個(gè)品種安徽已經(jīng)開(kāi)展8種，并且實(shí)現(xiàn)了全省地域全覆蓋，在已實(shí)現(xiàn)保費(fèi)中，能繁母豬保險(xiǎn)1805.62萬(wàn)元，小麥保險(xiǎn)12387萬(wàn)元，水稻保險(xiǎn)14789萬(wàn)元，油菜保險(xiǎn)2190萬(wàn)元。2009年上半年已實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)保險(xiǎn)保費(fèi)收入3.39億元，同比增長(zhǎng)了10.7倍，農(nóng)業(yè)保險(xiǎn)賠款已達(dá)9484萬(wàn)元。
2、新型農(nóng)村合作醫(yī)療服務(wù)水平提高。安徽省合作醫(yī)療參合率不斷上升，管理體制和運(yùn)行機(jī)制不斷完善，已經(jīng)初步建立了適應(yīng)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展水平的新型農(nóng)村合作醫(yī)療制度。2008年，安徽新型農(nóng)村合作醫(yī)療制度以縣為單位實(shí)現(xiàn)全覆蓋，參合標(biāo)準(zhǔn)由每人50元提高到100元，新型合作醫(yī)療參合率達(dá)到90.1%，全省每萬(wàn)人口專業(yè)衛(wèi)生技術(shù)人員數(shù)達(dá)到30.7人，住院實(shí)際補(bǔ)償率也明顯提高（見(jiàn)圖1）。
（四）傳統(tǒng)養(yǎng)老保險(xiǎn)出現(xiàn)缺陷，新型農(nóng)村養(yǎng)老保險(xiǎn)亟待普及
安徽是全國(guó)12個(gè)較早進(jìn)入老齡化的省份之一，農(nóng)村養(yǎng)老形勢(shì)十分嚴(yán)峻。現(xiàn)在采用村民年度繳納的保險(xiǎn)費(fèi)總額與村民年現(xiàn)金純收入的比來(lái)考察在沒(méi)有其他補(bǔ)助情況下的農(nóng)民繳納養(yǎng)老保險(xiǎn)費(fèi)能力。
農(nóng)村居民一般能接受保費(fèi)是年收入的5%-10%。從表1中可以看出無(wú)論在哪種利率水平下，40歲以后開(kāi)始投保時(shí)保費(fèi)占純收入比基本都已接近或者超過(guò)10%，這對(duì)大多數(shù)農(nóng)村居民是難以承受的。較高的參保費(fèi)用成了制約農(nóng)村養(yǎng)老保險(xiǎn)發(fā)展的瓶頸。目前的新型農(nóng)村養(yǎng)老保險(xiǎn)主要依據(jù)個(gè)人繳費(fèi)、集體補(bǔ)助和政府補(bǔ)貼三方并進(jìn)的籌資渠道。安徽省100多個(gè)縣區(qū)僅有12個(gè)被列入新型農(nóng)村養(yǎng)老保險(xiǎn)政策試點(diǎn)，這意味著新農(nóng)保試點(diǎn)明顯存在面過(guò)窄、實(shí)現(xiàn)全覆蓋時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的問(wèn)題。
二、制約安徽省農(nóng)村保險(xiǎn)服務(wù)體系構(gòu)建的主要因素
（一）農(nóng)村居民保險(xiǎn)意識(shí)淡薄
受小農(nóng)經(jīng)濟(jì)的影響，傳統(tǒng)的生產(chǎn)生活方式對(duì)居民的意識(shí)形態(tài)、消費(fèi)習(xí)慣影響依然很大，形成了養(yǎng)兒防老、自擔(dān)風(fēng)險(xiǎn)的習(xí)慣，農(nóng)民較少考慮購(gòu)買養(yǎng)老保險(xiǎn)。農(nóng)民保險(xiǎn)意識(shí)是決定保險(xiǎn)有效需求的一個(gè)重要因素，保險(xiǎn)有效需求不足直接影響保險(xiǎn)服務(wù)體系的構(gòu)建。
（二）農(nóng)村居民收入水平偏低，影響保險(xiǎn)市場(chǎng)擴(kuò)大
安徽是全國(guó)自然災(zāi)害最頻繁的省份之一，農(nóng)業(yè)災(zāi)害以旱災(zāi)和洪澇災(zāi)害為主。2008年全省農(nóng)作物受災(zāi)面積達(dá)1595.17欠公頃，絕收19498公頃。其中：旱災(zāi)受災(zāi)面積795.84千公頃，絕收面積達(dá)78.79千公頃；洪澇災(zāi)害農(nóng)作物受災(zāi)面積458.97千公頃，絕收面積46.14千公頃。頻發(fā)的自然災(zāi)害造成了農(nóng)民收入水平低的局面。另外，長(zhǎng)期以來(lái)安徽省農(nóng)民人均生活費(fèi)支出已經(jīng)占據(jù)了人均純收入的大部分（見(jiàn)表2），收入水平低是造成農(nóng)村保險(xiǎn)有效需求不足的直接原因。
（三）保險(xiǎn)產(chǎn)品單一，不能滿足農(nóng)村發(fā)展需要
目前實(shí)施的保險(xiǎn)險(xiǎn)種還比較單一，保險(xiǎn)公司普遍沒(méi)有針對(duì)廣大農(nóng)村的具體實(shí)際情況開(kāi)展符合農(nóng)村情況并為農(nóng)民普遍接受的農(nóng)村保險(xiǎn)品種，而是簡(jiǎn)單地把按照城鎮(zhèn)居民消費(fèi)水平制度的保險(xiǎn)品種直接投放到農(nóng)村市場(chǎng)。由于險(xiǎn)種不合時(shí)宜，導(dǎo)致廣大農(nóng)民對(duì)購(gòu)買保險(xiǎn)的積極性不高。
（四）保險(xiǎn)公司服務(wù)水平有待提升
農(nóng)村保險(xiǎn)營(yíng)銷員文化程度普遍較低，隊(duì)伍穩(wěn)定性差，宣傳服務(wù)工作不足，直接影響到群眾對(duì)保險(xiǎn)行業(yè)的信任度。同時(shí)農(nóng)村保險(xiǎn)宣傳、保險(xiǎn)咨詢、代收保費(fèi)總是在固定地點(diǎn)進(jìn)行，其他保險(xiǎn)服務(wù)的提供少之又少。在農(nóng)村業(yè)務(wù)量大面廣極度分散且以小額賠付居多的情況下，保險(xiǎn)公司從報(bào)案處理到查勘理賠再到支付保費(fèi)，服務(wù)難以及時(shí)到位，使農(nóng)村保戶在出險(xiǎn)后得不到應(yīng)有的服務(wù)，從而對(duì)保險(xiǎn)失去信心。
三、構(gòu)建安徽省農(nóng)村保險(xiǎn)服務(wù)體系對(duì)策和建議
（一）擴(kuò)大農(nóng)村保險(xiǎn)宣傳工作
保險(xiǎn)機(jī)構(gòu)可以通過(guò)保險(xiǎn)移動(dòng)宣傳畫欄、農(nóng)村保險(xiǎn)知識(shí)宣講團(tuán)、編發(fā)農(nóng)村保險(xiǎn)產(chǎn)品手冊(cè)等豐富多彩的形式，走進(jìn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)和農(nóng)村，深入開(kāi)展農(nóng)村保險(xiǎn)知識(shí)普及和宣傳工作。各級(jí)地方政府要?jiǎng)訂T農(nóng)村基層干部投保期限短、保費(fèi)低的保險(xiǎn)險(xiǎn)種，使他們及時(shí)得到經(jīng)濟(jì)補(bǔ)償?shù)膶?shí)惠，并通過(guò)他們以自己親身經(jīng)歷進(jìn)行保險(xiǎn)宣傳教育。
（二）加強(qiáng)農(nóng)村保險(xiǎn)產(chǎn)品創(chuàng)新
保險(xiǎn)公司要堅(jiān)持長(zhǎng)期經(jīng)營(yíng)、差異化經(jīng)營(yíng)的原則，提供具有農(nóng)村特色的產(chǎn)品，樹立以農(nóng)民為中心的服務(wù)意識(shí)，形成完善的農(nóng)村保險(xiǎn)產(chǎn)品體系。在推廣農(nóng)民有支付能力的農(nóng)村小額保險(xiǎn)產(chǎn)品廣覆蓋險(xiǎn)種的同時(shí)，適當(dāng)開(kāi)發(fā)一些中高檔險(xiǎn)種，滿足不同收入層次農(nóng)民的保障需要；針對(duì)農(nóng)民所關(guān)注的問(wèn)題，采用針對(duì)性的保險(xiǎn)險(xiǎn)種方案來(lái)增加農(nóng)民對(duì)保險(xiǎn)的興趣；針對(duì)農(nóng)民經(jīng)濟(jì)收入不穩(wěn)定的特性，可以推出繳費(fèi)方式更加靈活的保險(xiǎn)產(chǎn)品。
（三）拓展農(nóng)村保險(xiǎn)營(yíng)銷渠道
1、培養(yǎng)營(yíng)銷隊(duì)伍。大力發(fā)展駐村營(yíng)銷員，提升他們?cè)诋?dāng)?shù)厝罕姷牧己眯蜗?，并且在激?lì)政策上給予適當(dāng)?shù)膬A斜，增強(qiáng)他們的責(zé)任感。
2、延伸保險(xiǎn)分支機(jī)構(gòu)。在市場(chǎng)有需求、發(fā)展有潛力、管控能到位的情況下，鼓勵(lì)保險(xiǎn)公司向農(nóng)村地區(qū)延伸分支機(jī)構(gòu)。
3、發(fā)揮農(nóng)村社會(huì)網(wǎng)絡(luò)優(yōu)勢(shì)。通過(guò)農(nóng)村郵政、信用社、電力等系統(tǒng)的網(wǎng)點(diǎn)優(yōu)勢(shì)，對(duì)與各自業(yè)務(wù)相關(guān)的財(cái)產(chǎn)保險(xiǎn)、人身意外險(xiǎn)等產(chǎn)品進(jìn)行銷售。
4、發(fā)展農(nóng)村保險(xiǎn)中介機(jī)構(gòu)。鼓勵(lì)保險(xiǎn)中介機(jī)構(gòu)積極參與農(nóng)村保險(xiǎn)市場(chǎng)的分工協(xié)作，積極向農(nóng)村地區(qū)延伸服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)，逐步確立經(jīng)營(yíng)特色和品牌價(jià)值。
（四）加強(qiáng)售后服務(wù)，贏得農(nóng)村居民信任
1、理賠環(huán)節(jié)。客戶出險(xiǎn)后，按合同要求及時(shí)理賠是保險(xiǎn)公司贏得客戶信任的關(guān)鍵措施。可以通過(guò)召開(kāi)理賠現(xiàn)場(chǎng)會(huì)改變保險(xiǎn)商品使用價(jià)值不直觀的特點(diǎn)。2009年郎溪縣遭受罕見(jiàn)的龍卷風(fēng)等自然災(zāi)害襲擊后，保險(xiǎn)經(jīng)辦機(jī)構(gòu)對(duì)投保午季農(nóng)作物受災(zāi)情況立即進(jìn)行了現(xiàn)場(chǎng)查勘定損，農(nóng)戶先后領(lǐng)到理賠資金共計(jì)278.8萬(wàn)元。
2、防災(zāi)防損環(huán)節(jié)。保險(xiǎn)防災(zāi)防損是保險(xiǎn)經(jīng)營(yíng)的重要環(huán)節(jié)。保險(xiǎn)公司擁有眾多防災(zāi)防損專家和豐富的防災(zāi)防損工作經(jīng)驗(yàn)，可以向農(nóng)村居民提供各種防災(zāi)防損服務(wù)。
3、提供富有特色的咨詢服務(wù)。針對(duì)農(nóng)村地區(qū)醫(yī)療條件較差的情況，定期對(duì)投保農(nóng)民進(jìn)行必要的身體健康檢查，傳授各種簡(jiǎn)易的自救、自檢常識(shí)；經(jīng)常深入農(nóng)村，聽(tīng)取最基層的意見(jiàn)和保險(xiǎn)需求；在每個(gè)機(jī)構(gòu)網(wǎng)點(diǎn)設(shè)立免費(fèi)咨詢和投訴服務(wù)臺(tái)，為農(nóng)民提供貼心的保險(xiǎn)服務(wù)。
（五）加強(qiáng)保險(xiǎn)公司內(nèi)部管理，提高服務(wù)質(zhì)量
保險(xiǎn)公司要轉(zhuǎn)變觀念，加強(qiáng)內(nèi)部管理。保險(xiǎn)員工注意儀表端莊，態(tài)度友好，針對(duì)農(nóng)村保險(xiǎn)服務(wù)的特殊性選擇適宜的交談方式，做到條款解釋通俗化，讓農(nóng)民真正感受到優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。保險(xiǎn)公司要結(jié)合農(nóng)村保險(xiǎn)具體特征，平衡展業(yè)、承保、理賠各個(gè)步驟的服務(wù)能力，使保險(xiǎn)經(jīng)營(yíng)規(guī)范有序，并且在實(shí)踐中注意總結(jié)和探索。
（六）支持地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展，提高農(nóng)村居民收入
經(jīng)濟(jì)學(xué)理論告訴我們，人們規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)的偏好與其自身經(jīng)濟(jì)實(shí)力有關(guān)。一般而言，經(jīng)濟(jì)越困難的群體，越不愿意購(gòu)買保險(xiǎn)；隨著收入的不斷增加，對(duì)保險(xiǎn)的需求才會(huì)增加。保險(xiǎn)公司應(yīng)力所能及地支持地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展，推動(dòng)保險(xiǎn)資金投資農(nóng)村交通、通訊等基礎(chǔ)設(shè)施項(xiàng)目，提高農(nóng)村居民收入水平，從而提高農(nóng)村地區(qū)保險(xiǎn)需求，同時(shí)提高保險(xiǎn)公司的社會(huì)信譽(yù)。
（七）政府出臺(tái)相應(yīng)政策，改善外部環(huán)境
1、加大補(bǔ)貼。首先，加大對(duì)農(nóng)民生產(chǎn)生活產(chǎn)生重要影響的農(nóng)機(jī)、農(nóng)具以及農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)設(shè)施等方面保險(xiǎn)的補(bǔ)貼、優(yōu)惠政策。其次，政府可通過(guò)立法來(lái)明確規(guī)定對(duì)農(nóng)村保險(xiǎn)的稅賦減免。
2、加強(qiáng)保險(xiǎn)人才的培養(yǎng)?？梢砸愿叩仍盒橐劳?，加強(qiáng)農(nóng)業(yè)保險(xiǎn)專業(yè)人才的培養(yǎng)。目前，安徽省有六所高校開(kāi)辦了保險(xiǎn)學(xué)專業(yè)，可以考慮以這些高校為依托，開(kāi)展農(nóng)村保險(xiǎn)各項(xiàng)課題研究，為安徽省發(fā)展農(nóng)村保險(xiǎn)事業(yè)培養(yǎng)高素質(zhì)的專業(yè)后備人才。
3、建立農(nóng)村保險(xiǎn)發(fā)展激勵(lì)制度。各級(jí)地方政府及其職能部門的領(lǐng)導(dǎo)和工作人員可以將農(nóng)村保險(xiǎn)事業(yè)的發(fā)展情況納入到各級(jí)政府及其職能部門的政績(jī)考核體系中去，真正認(rèn)識(shí)到農(nóng)村保險(xiǎn)的發(fā)展對(duì)于構(gòu)建和諧社會(huì)的重要作用。
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關(guān)鍵詞：曝氣生物濾池；BIOSTYR Biofor BIOSMEDI
1 曝氣生物濾池工藝發(fā)展和特點(diǎn)
曝氣生物濾池(biological aerated filter)與普通活性污泥法相比，具有有機(jī)負(fù)荷高、占地面積小、投資少(節(jié)約30%)、不會(huì)產(chǎn)生污泥膨脹、氧傳輸效率高、出水水質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)，但它對(duì)進(jìn)水SS要求較嚴(yán)(SS≤100 mg/L)，因此對(duì)進(jìn)水需要進(jìn)行預(yù)處理。同時(shí)，它的反沖洗水量、水頭損失都較大。
我國(guó)一部分工業(yè)廢水的處理采用了此項(xiàng)技術(shù)。國(guó)內(nèi)許多科研設(shè)計(jì)單位對(duì)曝氣生物濾池也進(jìn)行了試驗(yàn)研究。隨著曝氣生物濾池在世界范圍內(nèi)不斷推廣和普及，很多學(xué)者在其結(jié)構(gòu)形式、功能、啟動(dòng)和濾料等方面進(jìn)行了詳細(xì)的研究，取得了很多成果。
2 國(guó)內(nèi)外發(fā)展情況
2.1 BIOSTYR?工藝
BIOSTYR?工藝是一種上向流生物濾池，是一種運(yùn)行可靠、自動(dòng)化程度高、出水水質(zhì)好、抗沖擊能力強(qiáng)和節(jié)約能耗的新一代污水處理革新工藝。BIOSTYR? 工藝是成熟/高效的一種污水生物處理工藝，其參與生物處理的生物附著在顆粒狀濾料上。污水通過(guò)濾料，其中含有的污染物被濾料表層上的生物膜降解轉(zhuǎn)化，同時(shí)，溶解狀態(tài)的有機(jī)物和特定物質(zhì)也被去除，所產(chǎn)生的污泥保留在過(guò)濾層中，而只讓凈化的水通過(guò)，這樣可在一個(gè)密閉反應(yīng)器中達(dá)到完全的生物處理而不需在下游設(shè)置二沉池進(jìn)行固液分離。
2.2 Biofor?工藝
Biofor?（生物過(guò)濾氧化反應(yīng)池）是得利滿水務(wù)繼滴濾池、Biodrof干式過(guò)濾系統(tǒng)之后的專為污水處理廠設(shè)計(jì)的第三代生物膜反應(yīng)池。與其它類型的生物過(guò)濾工藝相比， Biofor? 主要具有下列特性：向上流生物過(guò)濾，使用特制的過(guò)濾及生物膜支持煤介：Biolite生物濾料 ，高性能曝氣，流體完全均勻的分布，有效的沖洗。
2.3 BIOSMEDI工藝
BIOSMEDI生物濾池以輕質(zhì)顆粒濾料為過(guò)濾介質(zhì)，濾料比重較小，一般約在0.1左右，粒徑的大小為4～5mm左右，這種濾料具有來(lái)源廣泛、濾料比表面積大、表面適宜微生物生長(zhǎng)、價(jià)格便宜、化學(xué)穩(wěn)定性好等一系列優(yōu)點(diǎn)。
濾池反沖洗采用脈沖沖洗的方法，反沖洗時(shí)在濾層下部形成一段氣墊層，當(dāng)氣墊層達(dá)到一定高度后，此時(shí)瞬時(shí)把氣墊層中的空氣通過(guò)閥門或虹吸的方法迅速排空，此時(shí)濾層中從上到下沖洗的水流量瞬時(shí)突然加大，導(dǎo)致濾料層突然向下膨脹，脈沖幾次后，可以把附著在濾料上的懸浮物質(zhì)脫落，再打開(kāi)排泥閥，利用生物濾池的出水進(jìn)行水漂洗，可有效地達(dá)到清潔濾料的目的。
3 應(yīng)用范圍
曝氣生物濾池的應(yīng)用范圍較為廣泛，其在水深度處理、微污染源水處理、難降解有機(jī)物處理、低溫污水的硝化、低溫微污染水處理中都有很好的、甚至不可替代的功能。
在低溫污水中，西寧第二污水處理廠由于冬季最低水溫約6℃，為了解決硝化問(wèn)題，在可行性研究報(bào)告報(bào)告中就推薦了曝氣生物濾池+A2/O處理工藝。
在中水回用中，大連馬欄河污水處理廠工程，采用的是法國(guó)得利滿A3D+Biofor工藝技術(shù)， 出水水質(zhì)達(dá)到三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，日處理污水12萬(wàn)噸，其中4萬(wàn)噸出水可回用于城市綠化，建筑施工，工業(yè)等。
在國(guó)內(nèi)，豬場(chǎng)糞便污水處理工程，印染廢水處理工程，腸衣加工廢水處理工程，淀粉廢水處理工程等中都有應(yīng)用。
4 問(wèn)題與前景
作為一種嶄新的水處理工藝——曝氣生物濾池正處在推廣之中。根據(jù)目前的研究和應(yīng)用情況，今后仍有好多問(wèn)題有待研究：生物膜的特點(diǎn)及其快速啟動(dòng)的方式；生物氧化功能和過(guò)濾功能之間的相互關(guān)系；反沖洗過(guò)程中生物膜的脫落規(guī)律等。
曝氣生物濾池中核心介質(zhì)――濾料的研究也會(huì)促進(jìn)該工藝在中國(guó)的應(yīng)用的范圍，BIOSTYR?、Biofor?兩種工藝功能比較強(qiáng)大，但在中國(guó)大范圍的應(yīng)用仍存在問(wèn)題，如專利問(wèn)題，再有它們從投資上都比較大，這也阻礙了這兩種工藝在中國(guó)的大范圍的應(yīng)用，所以特種濾料的的研究與生產(chǎn)的國(guó)產(chǎn)化將是曝氣生物濾池在國(guó)內(nèi)大范圍的應(yīng)用的關(guān)鍵。
參考文獻(xiàn)
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[中圖分類號(hào)]R978 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]C [文章編號(hào)]1673-7210（2007）08（a）-103-02
藥物不良反應(yīng)目前已成為臨床治療用藥的一個(gè)重要方面，為探討其特點(diǎn)和規(guī)律，本文對(duì)我院收集的63例抗菌藥物引起的不良反應(yīng)進(jìn)行回顧性分析。
1 資料與方法
本院自發(fā)呈報(bào)2000~2006年的不良反應(yīng)（ADR）病例資料512例，其中抗生素所致63例，分別對(duì)患者的基本概況、致不良反應(yīng)的藥物、合并用藥情況、給藥途徑、系統(tǒng)分類和臨床表現(xiàn)等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析。
2 結(jié)果
2.1 性別與年齡
男性38例，女性25例，其中1~18歲5例，19~60歲的35例，61~90歲的23例。其中年齡最大的88歲，最小的1歲。從年齡段看，18~29歲占6.35%，30~39歲占15.87%，40~49歲占14.29%，50~59歲占19.05%，60歲以上的占36.5%，18歲以下的占7.93%。各年齡組病例數(shù)及構(gòu)成見(jiàn)表1。
2.2 給藥途徑與不良反應(yīng)發(fā)生頻率關(guān)系
給藥途徑與不良反應(yīng)發(fā)生頻率的關(guān)系見(jiàn)表2?？梢钥闯?，靜脈用藥者不良反應(yīng)發(fā)生的比例高。
2.3 藥物種類和例次
引起不良反應(yīng)的抗菌類藥品種類分布見(jiàn)表3。從中得出頭孢菌素和青霉素引起的不良反應(yīng)最多，其次為喹諾酮類。
2.4 不良反應(yīng)涉及的器官系統(tǒng)及臨床表現(xiàn)
不良反應(yīng)涉及的器官系統(tǒng)及臨床表現(xiàn)見(jiàn)表4。以皮膚及附件損害多見(jiàn)，表現(xiàn)為各種皮疹、藥疹、瘙癢；其次為神經(jīng)系統(tǒng)，表現(xiàn)為頭昏、乏力、頭痛；消化系統(tǒng)不良反應(yīng)表現(xiàn)為惡心、嘔吐；心血管系統(tǒng)表現(xiàn)為胸悶、氣短，重者可發(fā)生過(guò)敏性休克。
3 分析
3.1 藥物不良反應(yīng)和個(gè)體因素有關(guān)
從表1可以看出，藥物不良反應(yīng)可發(fā)生在任何年齡組人群，其中大于60歲的共23例，占36.5%，老年患者比年輕患者（
3.2 藥物不良反應(yīng)與給藥途徑有關(guān)系
在不同給藥途徑中，以輸液滴注致藥物不良反應(yīng)最多，占82.54%。靜脈給藥，藥物直接進(jìn)入血液，同時(shí)注射液的pH、滲透壓、微粒、內(nèi)毒素等許多因素都可誘發(fā)不良反應(yīng)。在藥物的使用方法上，現(xiàn)國(guó)際上提倡口服給藥，限制注射給藥。目前，WHO已將注射劑人均用藥次數(shù)作為評(píng)定合理用藥的重要標(biāo)準(zhǔn)之一[2]。
3.3 引起藥物不良反應(yīng)的藥品類別
引起藥物不良反應(yīng)的藥品種類很多。在我院，以頭孢菌素、青霉素引起不良反應(yīng)最多。我院頭孢菌素引起不良反應(yīng)19 例，青霉素16例，喹諾酮類15 例，均與臨床使用率高有關(guān)系，頭孢菌素起效快，病人滿意度高，用量大；喹諾酮類因其抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)、不需要做皮試而廣泛使用。
3.4 藥物不良反應(yīng)的臨床表現(xiàn)
不良反應(yīng)以皮膚及附件損害多見(jiàn)，表現(xiàn)為各種皮疹、藥疹、瘙癢，與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道相符[3]；其次為神經(jīng)系統(tǒng)，表現(xiàn)為頭暈、乏力、頭痛；消化系統(tǒng)不良反應(yīng)表現(xiàn)為惡心、嘔吐；心血管系統(tǒng)表現(xiàn)為胸悶、氣短，重者可為過(guò)敏性休克，輕重不一。皮膚及附件系統(tǒng)損害占首位，這與此類反應(yīng)容易觀察有密切關(guān)系。而抗生素對(duì)其他系統(tǒng)的損害，如肝、腎、血液系統(tǒng)等損害的發(fā)現(xiàn)需要一個(gè)過(guò)程，且需要實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)支持，易漏報(bào)。
3.5 重視抗感染藥物的合理應(yīng)用
對(duì)頭孢菌素的使用，《中國(guó)藥典》和頭孢菌素類藥物使用說(shuō)明書中均無(wú)使用前必須做皮試的規(guī)定，但使用說(shuō)書提出對(duì)青霉素和頭孢菌素過(guò)敏禁用警示，所以使用前均做皮試，可減少不良反應(yīng)的發(fā)生。喹諾酮類使用率高，其典型的毒副作用是胃腸道反應(yīng)，皮膚過(guò)敏是其光毒性所致。
3.6 注意抗感染藥物的特殊性
為減少抗感染藥物不良反應(yīng)的發(fā)生，應(yīng)嚴(yán)格掌握抗生素使用的適應(yīng)證，在使用前最好做藥敏實(shí)驗(yàn)，以判斷何種致病菌感染，對(duì)哪些抗生素敏感，做到有的放矢。注意既往病史，有1例癲癇病人，1年未用抗癲癇藥，應(yīng)用左氧氟沙星后致癲癇復(fù)發(fā)。在臨床上使用青霉素需做皮試，而阿莫西林膠囊不需要，造成不良反應(yīng)和過(guò)敏反應(yīng)增多，需仔細(xì)詢問(wèn)病史，明確是否為過(guò)敏體質(zhì)。另有2例不良反應(yīng)者是當(dāng)天應(yīng)用了抗生素，1例使用了頭孢哌酮鈉，1例使用了頭孢唑林，飲酒后15 min左右,開(kāi)始出現(xiàn)戒酒硫樣反應(yīng),表現(xiàn)為面部發(fā)熱、眼結(jié)膜充血、搏動(dòng)性頭痛、頭暈，胸悶、胸痛、心跳加快、呼吸困難。 許多抗菌藥具有與雙硫侖相似的作用，用藥后若飲酒，同樣會(huì)導(dǎo)致雙硫侖樣反應(yīng)。這些藥物包括：①頭孢菌素類藥物中的頭孢哌酮、頭孢美唑、頭孢米諾、拉氧頭孢、頭孢甲肟、頭孢孟多、頭孢曲松、頭孢氨芐（先鋒Ⅳ號(hào)）、頭孢唑林（先鋒Ⅴ號(hào)）、頭孢拉定（先鋒Ⅵ號(hào)）、頭孢克洛等，其中以頭孢哌酮致雙硫侖樣反應(yīng)的報(bào)告最多、最敏感；②硝咪唑類藥物如甲硝唑（滅滴靈）、替硝唑、奧硝唑、塞克硝唑；③其他抗菌藥如呋喃唑酮（痢特靈）、氯霉素、酮康唑、灰黃霉素等。其不良反應(yīng)程度依次是頭孢哌酮>拉氧頭孢>頭孢美唑[4]。因此有研究者建議在使用上述抗菌藥物期間及停藥后20 d內(nèi)，均應(yīng)避免飲酒或進(jìn)食含乙醇的制品。
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