發(fā)布時間：2023-09-12 17:09:31
序言：寫作是分享個人見解和探索未知領(lǐng)域的橋梁，我們?yōu)槟x了8篇的藝術(shù)表演形式樣本，期待這些樣本能夠為您提供豐富的參考和啟發(fā)，請盡情閱讀。
一、合唱藝術(shù)的特點
合唱有不同的種類以及各類合唱的組成,不同種類、不同的合唱組成等。無論哪一種合唱,合唱作品中有哪些形式,合唱藝術(shù)都具有以下幾個特點:
(一)協(xié)調(diào)
合唱是一種集體聲樂活動。在集體中又形成了若干的基層組成部分。這種基層的組成部分就是聲部的分部。每個聲部在集體音響中必須達到協(xié)調(diào)的要求。協(xié)調(diào)是由音量、音色、音準(zhǔn)(或音高)三種因素結(jié)合而成的。合唱的音響只有每個聲部中在這三個因素取得相互應(yīng)有的聯(lián)系時,才能夠獲得協(xié)調(diào)的效果。
(二)色調(diào)
音樂在進行中的時候,是需要通過一定的時間來表達內(nèi)容,來表達內(nèi)心的思想感情的。色調(diào)的形成必須要根據(jù)作品的內(nèi)容,每一首合唱作品都有它獨有的色調(diào)。主調(diào)性和復(fù)調(diào)性的合唱作品在色調(diào)上也各有自己的特性,同時也存在著一定的共性。色調(diào)是合唱作品藝術(shù)再現(xiàn)時在橫的方面每一瞬間與前后瞬間的應(yīng)有的相互的關(guān)系。
(三)咬字與吐字
在合唱中,語言是歌唱的靈魂,咬字和吐字是合唱學(xué)中不可缺少的重要部分。合唱作品也是一種音樂與文學(xué)語言相互結(jié)合的藝術(shù)成果。因此,在藝術(shù)再現(xiàn)過程中,必須使文學(xué)語言與音樂相互結(jié)合得非常密切,使得作品的思想內(nèi)容表現(xiàn)得更加清晰透徹。各種學(xué)派的歌唱方法都是根據(jù)它的語言而有所區(qū)別的。研究咬字和吐字,絕對不是僅僅為了咬字吐字要清晰,更重要的是要求不同語言的合唱作品在藝術(shù)再現(xiàn)時求得音樂表現(xiàn)和語言特征上的相互統(tǒng)一。
(四)選材、準(zhǔn)備、排練和演出
合唱作品的藝術(shù)再現(xiàn)是通過演唱形式來完成的。但是我們在演唱之前,必須經(jīng)過選材、準(zhǔn)備還有排練等過程。在這些過程中,要利用一切可以利用的物質(zhì)音響條件來完成更好的藝術(shù)再現(xiàn)。排練以及演出場所所需要的物質(zhì)條件、音響設(shè)備等等,還有各個合唱隊員演唱時思想上的準(zhǔn)備,都是合唱藝術(shù)工作者應(yīng)該研究和掌握的問題。
二、合唱的表演形式
(一)合唱團隊的組織結(jié)構(gòu)
合唱團通常是由一名指揮或者首席演唱員負責(zé)其排練和演出的工作。如今,大部分的合唱團都是由四個聲部組成的,因此合唱團是可以演唱四部和聲。合唱團隊的每個聲部人數(shù)并沒有固定的限制,一般而言,只需要足夠的合唱隊員人數(shù)演唱就可以了。合唱團隊的表演可以有樂器伴奏,也可以無樂器伴奏。伴奏形式多種多樣,可以用一件樂器伴奏,甚至還可以使用完整的樂隊為合唱團伴奏。美國合唱指揮協(xié)會組織傾向于無伴奏合唱,因為無伴奏合唱是專門指教堂的演唱方式。大部分合唱作品雖然有樂隊編制在內(nèi),但是在演出或者排練的時候,都可以采用鋼琴和管風(fēng)琴伴奏。
(二)合唱團的種類
根據(jù)不同種類的人聲,合唱團均可劃分為以下幾種類型:
1、混聲合唱團。由女聲(或童聲)與男聲混合組織的合唱叫做混聲合唱。混聲合唱團是最常見的表演形式,混聲合唱團是由女高音、女中音、男高音和男低音四個聲部組成的,縮略語為SATB。混聲合唱團還可以將每個聲部分成兩個,即:SSAATTBB組合。
2、女聲合唱團。此種表演形式的團隊通常都是由女高音和女中音組成的,還可以將其一分為二,即:SSAA組合。也可以分成SSA三個聲部,即兩個女高音聲部,一個女中音聲部。
3、男聲合唱團。男聲合唱團是由兩個男高音聲部,一個此男低音聲部與一個男低音聲部組成的。其縮略語為:TTBB。如果是ATBB組合,女中音聲部則是由假男高音聲部演唱。這種組合一般是四部和聲化的無伴奏合唱形式;旋律的每一個音都配上了和聲,整個作品基本上都是縱向織體,每個聲部都起著重要作用,通常都是由帶領(lǐng)聲部演唱旋律,男高音聲部則是在帶領(lǐng)聲部上方構(gòu)成和聲,男低音演唱和弦的最低音,此男低音則是在帶領(lǐng)聲部的下方填滿和聲。
4、童聲合唱團。此種合唱團均由兩個聲部SA,或者三個聲部SSA組成。有時候還有更多的聲部組合。南通生合唱團也是屬于此種類型的。
三、合唱的基本訓(xùn)練
合唱是一種集體歌唱的音樂表現(xiàn)形式。因此,在合唱訓(xùn)練中,聲樂方面在共性的要求上是極為突出的。然而這些共性要求必須經(jīng)過一定的訓(xùn)練才可以獲得的。我認為每一位合唱成員要發(fā)揮在集體中的主動性和積極性,沒有主動性和積極性的演唱時沒有生氣,沒有情感的。然而這種主動性和積極性也一樣要通過訓(xùn)練和培養(yǎng)的。另外,我們還要訓(xùn)練每一位成員的準(zhǔn)確性、靈活性、敏捷性和集體適應(yīng)性。每一位合唱成員只有在熟練地掌握這些技巧后,才能夠產(chǎn)生合唱作品藝術(shù)再現(xiàn)時的完美效果。合唱訓(xùn)練過程中主要要求概括以下幾點:
(一)訓(xùn)練每一位成員要具有統(tǒng)一的姿勢。要有統(tǒng)一的“起聲”以及在發(fā)聲時對有關(guān)各個器官、神經(jīng)和肌肉在相互協(xié)調(diào)動作中能有統(tǒng)一的活動動態(tài)。
(二)訓(xùn)練每一位成員要有調(diào)整自己的狀態(tài)和聲音的能力,同時要訓(xùn)練適應(yīng)集體音響效果的能力。在音量、音色和音準(zhǔn)等方面要適應(yīng)合唱各個聲部之間的協(xié)調(diào)關(guān)系。
(三)訓(xùn)練各個成員在演唱表現(xiàn)上的敏捷性、準(zhǔn)確性和善變性。同時訓(xùn)練對指揮要求的反應(yīng)靈敏;對色調(diào)中音量、音色以及速度方面變化的層次差別的適應(yīng)能力。
(四)訓(xùn)練每位成員對作品藝術(shù)再現(xiàn)方面的內(nèi)在主動性和積極性。在表達合唱作品的內(nèi)容時,要求對歌詞方面的咬字和吐字要達到清晰準(zhǔn)確。
關(guān)鍵字：當(dāng)代藝術(shù)；女性身體；詩性
傳統(tǒng)意義下女性身體的詩性肌質(zhì)及身體意象是本文的研究范圍。而身體范疇本身具有多義性，從不同的角度和不同的側(cè)面，都有不同的認知。不過有一點是共同的，那就是在人文科學(xué)領(lǐng)域里，身體不再是純粹的生理之軀，它從單純的肉體和器官的命名走向了更復(fù)雜的文化內(nèi)涵。同樣，女性身體也絕非僅是可見的肉體結(jié)構(gòu)和固定不變的，它具有多重層面的涵義，是一種觀念的表現(xiàn)。即女性身體觀念，這是指在某一階段，人們對女性身體的認識和思考，而在這個過程中會呈現(xiàn)出一種觀念形態(tài)，那就體現(xiàn)在藝術(shù)創(chuàng)作中。如：情感、欲望和氣質(zhì)等等，成了我們個人辨視自我存在的主體和載體。所以，在論文中一直用雙引號強調(diào)，即“女性身體”。
一、詩性：傳統(tǒng)意義下“女性身體”的解讀
詩性這一概念最早提出源自意大利著名學(xué)者楊巴蒂斯塔•維柯(l668-1744)的《新科學(xué)》(全名《關(guān)于各民族共同性的新科學(xué)的原則》)。他認為詩性智慧起源于“一種粗糙的玄學(xué)”(即自然神學(xué))。從狹義的指是“詩歌的特性”,廣義的則是指“藝術(shù)性和審美性”。但中國傳統(tǒng)詩性是用象征、靠直覺、注重體驗等一系列特點決定了人們以一種審美的態(tài)度去觀照自然和人生，通過各種感性的體驗來實現(xiàn)超越,最終達到一種自由理想的境界。
二、女性的特質(zhì)：詩性肌質(zhì)
女性的特質(zhì)與物質(zhì)性的傳統(tǒng)關(guān)聯(lián)靈異追溯到一系列詞源學(xué)那里，它們把物質(zhì)(matter)與母親(mater)和子宮(matrix)聯(lián)系起來，并因此使物質(zhì)與有待探究的生殖產(chǎn)生了聯(lián)系。這就是與男性身體存在著生理性別的自然差異。因為，決定男女性別的不同在于兩種不同的染色體，而這兩種不同的性染色體基因不但決定了人的不同性別所呈現(xiàn)的外在身體形態(tài)，而且還決定了性別的不同內(nèi)部特征。這都是心理學(xué)和遺傳學(xué)所研究證明的。西蒙娜•德•波伏娃在生物學(xué)的啟示下編著一本《女性的秘密》中就探討過男性身體和女性身體的本質(zhì)差異性，得出結(jié)論是：男性在自己身體的成長發(fā)育過程中，他的身體同他的自我是一體的（他就是他的身體）；而女性的成長發(fā)育過程卻往往比男性更復(fù)雜，更神秘。雖然她們和男性一樣擁有自己的身體，但母親的身份使她的身體構(gòu)造似乎天然地固有一種他屬性：如每個月的經(jīng)期都在為一個外來生命準(zhǔn)備好一個溫床，懷孕后女性身體體驗著一種更為深刻的身體異化，女性整個身體都朝著如何喂養(yǎng)外來生命準(zhǔn)備而變化；雖說是女性身體的一部分，卻也只是起著為外來生命提供乳汁滋養(yǎng)生命的作用。這些詩性肌質(zhì)的優(yōu)勢有助于提供給我們不一樣的審美參照。也正說明了女性身體更富于詩性的思維和感性的靈氣，承載著更豐富而沉重的內(nèi)涵。
三、中國傳統(tǒng)文化體系的塑造
傳統(tǒng)文化是中國古圣先賢幾千年經(jīng)驗、智慧的結(jié)晶。它作為一種文化形態(tài)，本身就具備文化科學(xué)價值。但隨著時間的不斷推移，文化及社會背景下的不同，女性的意識觀念也緊跟著不斷的改變，一定時代的文化對女性的行為和生活也會有更多地規(guī)范和制約，它們始終是緊密聯(lián)系在一起的。在中國傳統(tǒng)文化中，我們的祖先總是運用豐富的想象力對自然萬物的形態(tài)加以概括、提煉和塑造。女性與男性都是時代文化的創(chuàng)造者，但是祖先崇拜最初是從女性開始的，因此，人們自然地把自己的祖先塑造成了女性神祗。女媧就是一個例子，她是中國最早的女神，創(chuàng)造了人類，也拯救了天下。以難以想象的內(nèi)在力量和無法形容的奇?zhèn)バ蜗髠鳜F(xiàn)在世上，并獲取了天上神祗的地位。當(dāng)然這種描述是神化了的，但是，我們透過這層原始崇拜的夸張迷霧，會發(fā)現(xiàn)這其實是母系氏族社會折射的閃光。中國的封建社會幾乎可以說沒有嚴(yán)格意義的藝術(shù)出現(xiàn)。但在中國歷史上的開明時期，人們是經(jīng)歷過了一段歌舞昇平的年代，藝術(shù)才達到一個偉大的高峰。形象才慢慢成為藝術(shù)主題被描繪。如敦煌的唐代彩塑等傳統(tǒng)藝術(shù)當(dāng)中就有很多作品以“女性身體”作為主題，尤其那些精美的觀音塑像，形體豐滿、曲線優(yōu)美、神情嫵媚、動作嫻雅。但通常被理解與處理在被欣賞的位置。盡管他們不是嚴(yán)格意義上的形象，但這些藝術(shù)作品明顯地透露出女性特有的魅力，也充分的反映了這個時代的成就。而女性的生理特征這些自然屬性是天生注定的，對于女性來說是無法改變的事實，但是在傳統(tǒng)意義下，還是有很多標(biāo)準(zhǔn)和不同是后天的文化體系中所形成的?？墒?，那個階段的女性都是不斷地遵循這些標(biāo)準(zhǔn)來對照自己的。所以，傳統(tǒng)文化中對“女性身體”的表現(xiàn)，雖然所包涵的旨趣不完全一樣，但是作為一種藝術(shù)觀照，實質(zhì)還是相同的，都是靈與肉的一種結(jié)合。
四、結(jié)語
綜上所述，中國傳統(tǒng)文化中的“女性身體”是可以在不受現(xiàn)實限制的詩性想像和詩性表現(xiàn)中自由展開。盡管它永遠不可能完美，卻永遠追求著身體的完美，形成了身體的詩性傾向。這正所謂“詩性身體是身體追求靈魂自由的根本狀態(tài)，是靈魂追求與肉體實現(xiàn)的統(tǒng)一。”但是，“女性身體”的這種詩性自由其實是傳統(tǒng)社會文化對女性施加的影響，造成了性別文化意識的差別，也就演變成了女性長久以來一直符合男性標(biāo)準(zhǔn)的不變形象。
參考文獻
[1][意]維柯．朱光潛譯．新科學(xué)[M]．北京：人民文學(xué)出版社，1986．
[2]朱迪斯•巴特勒．汪民安編．后身體文化、權(quán)力和生命政治學(xué)[M]．長春：吉林人民出版社，2004．
[3（]法）西蒙娜•德•波伏娃《.女性的秘密》.曉宜，張亞莉等譯.北京:中國國際廣播出版社.1988.
[4]陳醉.藝術(shù)論[M].中國文聯(lián)出版社.1987.
關(guān)鍵詞：粵?。焕系?；舞臺表演形式；藝術(shù)張力；
文章編號：1674-3520（2015）-08-00-01
顧名思義，老旦就是指吸取表演中的老年婦女，其有著自身的表演特點和形式。但是其在粵劇的表演行當(dāng)中算是一個比較偏門的角色，通常情況下其在一部戲劇中的戲份較少，往往由其他行當(dāng)?shù)娜思娈?dāng)，所以在粵劇中老旦行當(dāng)并不為人重視，很少有人愿意去學(xué)，更不用說女孩子了。但是這并不能說明一部戲劇中可以忽略老旦的作用，與其他行當(dāng)一樣老旦猶如“鹽油”的角色在粵劇表演中的作用不可無視。唱、念、做、打四大類別是粵劇表演的基礎(chǔ)，我們就在下文從這四個方面對粵劇中老旦的舞臺表演形式做一番討論。
一、淺談粵劇老旦的舞臺表演形式
（一）平喉演唱，準(zhǔn)確使用唱腔。粵劇中老旦角色飾演的是經(jīng)歷了很多生活滄桑變化的老年婦女，因此和表演年輕的角色相比，其在聲音方面也要展現(xiàn)出一種歲月感，要有符合人物身份低沉穩(wěn)重的特點。因為平喉處于音色的中低區(qū)域，所以在粵劇老旦的舞臺表演中，其厚實沉穩(wěn)的音質(zhì)更適合表現(xiàn)老旦人物的身份特點。但是我們還應(yīng)該看到，每個老旦角色在人生經(jīng)歷方面都是不同的，這就在影響了老旦的性格等方面，因此為了表現(xiàn)出戲劇中人物角色的不同，我們還要在這個基礎(chǔ)上實現(xiàn)音色和基調(diào)的因人而變，戲曲工作者在飾演角色之前需認真研究所演角色人物的身份、性格、經(jīng)歷等，并在親身體會的基礎(chǔ)上決定采用何種音色演唱。
（二）移情入景，真情念白。因為唱詞可以在音律的附和中進行演唱，而念白則完全沒有任何可以輔助的因素，全憑演員自己的功力將其表達出來，并且在這個過程中還要根據(jù)人物的個性特點，以及舞臺當(dāng)時的人物關(guān)系情景對念白進行處理，在演員將情感真正與舞臺情景融合在一起的時候，才能準(zhǔn)確地把握念白的語調(diào)、語速等關(guān)鍵要素，從而將飾演人物的當(dāng)時當(dāng)?shù)氐那楦泻芎玫氖惆l(fā)出來。演員需要認真分析人物角色，移情入景，在角色體驗中實現(xiàn)感情的融合，找到與劇中角色的共鳴，然后將情感融入到念白中，真切地展現(xiàn)出所飾演人物的舞臺情感。
（三）恰當(dāng)表演身段，展現(xiàn)人物個性。粵劇表演中的“做”就是這里我們所說的身段，就是指演員通過臺步、走位、手勢等動作的表演將所飾演角色的情感、性格、經(jīng)歷等展現(xiàn)在舞臺上，而相對于戲劇中的臺詞，身段的表演并不是完全固定的，這一點在現(xiàn)代粵劇題材的表演中表現(xiàn)得更為突出。盡管這種非程式化的表演為演員的發(fā)揮和創(chuàng)新預(yù)留了空間，但是在一定程度上也加大了演員準(zhǔn)確把握表演身段的難度。演員們需要不斷的摸索、嘗試和練習(xí)，才能在現(xiàn)代粵劇表演中將身段表演地恰到好處，同樣這在老旦角色的表演方面就需要演員對角色有著更加深入的理解，才能把握好這個度。
（四）表情自然，真情流露?！按颉痹趹蚯谋硌葜兄饕傅氖俏浯蚝头募妓?，和“做”通常是的相互結(jié)合的。而我們考慮到老旦通常是年老體弱的老婦，所以除非是個別的劇目，如飾演《百歲掛帥》中的佘太君時，我們在個別場景里可以加入適當(dāng)?shù)奈湫挟?dāng)身段，其他大部分粵劇劇目中老旦角色的飾演都是沒有“打”戲的所以這就需要我們其他方面的努力來彌補“打”戲的缺失給人物情感展現(xiàn)帶來的影響。在這種情況下，結(jié)合老旦的行當(dāng)特點，戲曲演員要在面部表情到做足功課，將面部表情的變化融入到在唱、念、做的過程中，根據(jù)劇中人物情感的變化，展現(xiàn)不同的面部表情，在對人物角色性格、行為進行深刻剖析的情況下，現(xiàn)實表情的自然和真情的流露，只有這樣才能完美詮釋劇中的老旦角色，實現(xiàn)人物角色與舞臺情景和劇中情節(jié)的完美融合。
二、淺談粵劇老旦的藝術(shù)張力
（一）小人物與大智慧。一臺粵劇的成功，并不能只靠劇中的文武生和花旦主角的表演，如果要得到戲迷朋友們的認可，其他配角的表演也顯得特別重要，是一臺戲高水準(zhǔn)的保證。在舞臺角色戲份多少的分配中懸殊問題是在所難免的，但是這并不是說戲份少的角色并不重要，正如俗話說：只有小人物，沒有小角色?？紤]到老旦行當(dāng)同樣也是如此，盡管其是劇中的“小人物”，卻處處彰顯著大智慧，通常在劇中有畫龍點睛，推動劇中故事情節(jié)發(fā)展的作用。老旦是老年婦女的形象，她們在戲劇人物角色的設(shè)定通常是已經(jīng)經(jīng)歷過大半輩子的風(fēng)風(fēng)雨雨，這些老婦通常是從現(xiàn)實生活的人物中衍化而來，并通過藝術(shù)的升華和提煉將其展現(xiàn)在舞臺上，這樣在劇中和劇外生活共同的積淀中，老婦多就成為了生活經(jīng)驗的總結(jié)者，這其中蘊含著大智慧，她們能看透很多事物，生活的心境也多歸于平靜，往往能一句話點透困擾年輕人的情感事物，成為年輕人的精神導(dǎo)師。
（二）小人物與大氣度、大難度。從總體上看，老旦在粵劇十大行當(dāng)中是比較不受重視的人物角色，除了個別的劇目，其在很多的劇目中所占戲份很少，是戲曲中典型的小人物。但是這個小人物在飾演時并不能小看，她也有很多表演的形式和技巧，更重要的是她有著很多角色不具備的大氣度?；泟≈械睦系┬挟?dāng)展現(xiàn)的是劇中老年婦女的形象，人物性格多有著大氣度的特色，主要通過其表演形式展現(xiàn)出來。老旦角色人物的聲音多是低沉而有力，身段樸實而沉穩(wěn)，步伐剛健而穩(wěn)重，神態(tài)雍容而大度，眼神凌厲而睿智，在唱腔、念白、身段、表情各方面都在角色詮釋中有著較為精細的要求，其演繹難度并不像我們所想的那么容易，若想將角色飾演的出色，甚至比其他多數(shù)行當(dāng)還要難。在粵劇中的人物角色都有著自己各自的人生閱歷和性格特點。要想飾演出色，還必須將其人生閱歷考慮在內(nèi)，依此準(zhǔn)確變化和掌握自己的唱腔、念白、動作和表情等。
粵劇的老旦行當(dāng)是一個小人物的角色，但是其表演形式和藝術(shù)張力卻很復(fù)雜和宏大，戲劇工作者要想將其塑造成功，必須在日積月累的揣摩和練習(xí)中才能實現(xiàn)，因為實踐越長才能越和老旦角色產(chǎn)生共鳴。
參考文獻：
[1]吳俏紅. 行當(dāng)分類是戲曲表演的核心形式[J]. 南國紅豆， 2009， （4）.57-58.
[2]吳俏紅. 老旦的獨特意蘊[J]. 南國紅豆， 2009， （3）.55-56
關(guān)鍵詞：攝影；表現(xiàn)形式；創(chuàng)新
中圖分類號：J405 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1005-5312（2013）35-0032-01
攝影藝術(shù)常被作為視覺的眼睛，是技術(shù)與藝術(shù)結(jié)合產(chǎn)生的造型藝術(shù)，同時也是人類思想以及情感的藝術(shù)表達形式。攝影者通過攝影傳遞作者內(nèi)心的情感，將作者自身的主觀感覺以及情感因素通過影像表達出來。攝影藝術(shù)不像科學(xué)研究一樣，由于攝影師作者情感蘊含的寄托，因此攝影藝術(shù)的領(lǐng)域總是不斷創(chuàng)新的。因此，創(chuàng)新攝影藝術(shù)的表現(xiàn)形式，通過對攝影表達體系的創(chuàng)新改進，將主題充分的在影像上表達出來，已經(jīng)成為攝影者創(chuàng)作的新追求，這對于進一步激發(fā)群眾的智慧也具有重要的作用。
一、攝影藝術(shù)表現(xiàn)形式的基本要素
（1）空間感的表現(xiàn)。攝影藝術(shù)中空間感的表現(xiàn)主要是通過對影調(diào)以及線條層次的合理運用來實現(xiàn)，這也是將攝影作品的觀賞性引入深層次空間的關(guān)鍵。在具體的調(diào)整上主要是通過影調(diào)明暗以及線條的交織關(guān)系，來充分的表達攝影作品的空間感。
（2）立體感的表現(xiàn)。立體感往往是攝影過程中最難展現(xiàn)的要點以及重點，對客觀物體的三度空間進行展現(xiàn)也是攝影藝術(shù)表現(xiàn)的重要形式。對于攝影中立體感的表現(xiàn)主要是通過側(cè)光、逆光以及影調(diào)變化來實現(xiàn)。
（3）攝影作品質(zhì)感的表現(xiàn)。攝影作品的質(zhì)感主要是指攝影作品對題材結(jié)構(gòu)感的展現(xiàn)，這也是攝影作品意境表現(xiàn)的重要內(nèi)容，能夠發(fā)揮提高攝影作品整體藝術(shù)感染力的作用。
（4）作品動態(tài)美的展現(xiàn)。攝影作品的動態(tài)美就是指攝影者對于題材對象動感的表現(xiàn)，這也是提高作品感染力的途徑，攝影作為一項造型藝術(shù)，對于攝影作品動感的展現(xiàn)應(yīng)該憑借攝影者的造型語言以及攝影技巧藝術(shù)來表現(xiàn)。
（5）攝影作品韻律感的表現(xiàn)。韻律感以及節(jié)奏感也是攝影作品藝術(shù)形式美感的主要表現(xiàn)形式，如果攝影作品韻律感以及節(jié)奏感不足，也就會存在藝術(shù)感染力與號召力的不足，只有充分的融入韻律感才能使攝影作品變得更為生動鮮活。
二、攝影藝術(shù)表現(xiàn)形式創(chuàng)新的措施分析
（1）重視攝影作者自身氣質(zhì)的培養(yǎng)。攝影作者自身的氣質(zhì)，直接影響了攝影作者作品創(chuàng)新的個性，攝影作者的文化氣質(zhì)也直接反映了攝影作品的藝術(shù)氣質(zhì)。因此對攝影表現(xiàn)形式的創(chuàng)新，必須強化攝影者自身的文化氣質(zhì)培養(yǎng)。特別是在當(dāng)前世界文化不斷交融發(fā)展的今天，攝影者應(yīng)當(dāng)結(jié)合世界文化的發(fā)展趨勢，既要積極的借鑒學(xué)習(xí)優(yōu)秀作品的藝術(shù)表現(xiàn)形式，同時也要勇于批判容納不同類型的攝影作品。借助于攝影者文化視野的不斷拓寬以及知識理念的學(xué)習(xí)，創(chuàng)新攝影作者在攝影方面的思維以及激情，進而在攝影作品中更深層次的表達作者的情感世界，通過創(chuàng)新攝影者對于文化以及攝影藝術(shù)的理解與認識，豐富攝影藝術(shù)表現(xiàn)形式。
（2）在攝影藝術(shù)的表現(xiàn)過程中重視對于細節(jié)的表達。在攝影者進行攝影藝術(shù)創(chuàng)作過程中，除了必須能夠準(zhǔn)確熟練的運用攝影技巧，合理的選擇攝影造型語言之外，同時還應(yīng)該對于自己的攝影作品有著明確的認識以及定位。對于攝影藝術(shù)而言，將攝影者自身的情感充分的表達出來，同時也應(yīng)該積極的探索發(fā)現(xiàn)表現(xiàn)形式，這就要通過對于細節(jié)的整理來實現(xiàn)。攝影者在作品的創(chuàng)作過程中，應(yīng)該注重細節(jié)的表達以及處理，通過展現(xiàn)細節(jié)的獨特之處，在攝影作品中充分的傾注攝影者的真情實感以及個人情緒，將生活中的真實面以及代表性完全的展現(xiàn)出來。
（3）對攝影題材進行深層次的挖掘。由于攝影藝術(shù)是攝影者個人的視覺造型藝術(shù)行為，對攝影藝術(shù)表現(xiàn)形式創(chuàng)新的重點就是注重攝影者個性化的張揚，在攝影作品的創(chuàng)作過程中，應(yīng)該突破傳統(tǒng)的攝影理論以及攝影規(guī)則的限制，對攝影題材進行更深層次的挖掘。攝影作品創(chuàng)新的基本要求就是在攝影內(nèi)容以及攝影形式上的新穎，這也是使作品區(qū)別于其他作品特征的基本要求，通過題材深層次的探索發(fā)現(xiàn)以及標(biāo)新立異的創(chuàng)作思維實現(xiàn)表現(xiàn)形式的創(chuàng)新。
（4）綜合協(xié)調(diào)使用光線、影調(diào)以及色彩以及運動鏡頭。通過協(xié)調(diào)使用光線與影調(diào)，在攝影作品的畫面上充分體現(xiàn)出空間以及時間氛圍，刻意的展現(xiàn)以及隱蔽修飾，刻意增強攝影作品的造型表現(xiàn)力度以及藝術(shù)感染力度。色彩主要是指攝影作品中畫面的色彩、色反差、色飽和、對比度以及色溫色調(diào)等內(nèi)容，色彩也是攝影作品造型與藝術(shù)表現(xiàn)的重要手段，具有渲染氣氛以及調(diào)整情緒的目的，因此創(chuàng)新攝影作品的藝術(shù)表現(xiàn)形式，應(yīng)該對色彩的運用進行創(chuàng)新，通過在畫面中組織運用色彩來體現(xiàn)攝影者的真實情感。運動鏡頭主要是為了增強攝影作品的動感，通過運動鏡頭來展現(xiàn)攝影作品的速度以及節(jié)奏，這也是提高攝影作品視覺享受的重要表現(xiàn)手法，同時也是攝影作品思想以及意圖表現(xiàn)的重要形式。
三、結(jié)語
對攝影藝術(shù)進行表現(xiàn)形式的創(chuàng)新，是新時代對于攝影工作者創(chuàng)作的新要求，攝影者實現(xiàn)攝影藝術(shù)表現(xiàn)形式的創(chuàng)新，不僅僅是要停留在攝影藝術(shù)形式以及攝影技巧的創(chuàng)新，同時應(yīng)該轉(zhuǎn)變攝影者的個人思維，深入的觀察了解題材，捕捉題材的細節(jié)，以最新的形式表達真實的意境以及作者的情感，增強攝影作品的整體藝術(shù)感染力。
【關(guān)鍵詞】 脫氫表雄酮 神經(jīng)炎 實驗性自身免疫性 細胞免疫
脫氫表雄酮（dehydroepiandrosterone， DHEA）是3種腎上腺皮質(zhì)類固醇之一， 是雌激素和雄激素的前體物質(zhì)， 也是目前尚不明確的多種免疫調(diào)節(jié)性類固醇的前體物質(zhì)。體內(nèi)、 外研究證實DHEA及其代謝產(chǎn)物具有抗炎、 抗增殖和免疫調(diào)節(jié)活性， 對人和動物的免疫系統(tǒng)可產(chǎn)生有益的作用［1］。DHEA能改善病毒、 細菌或其他感染實驗動物的存活率［2］; 塵螨誘導(dǎo)的變應(yīng)性氣道疾病小鼠服用DHEA， 可降低支氣管灌洗液中嗜酸細胞數(shù)目， 降低IL4、 IL5、 IFNγ和IgE水平［3］; 超生理濃度的DHEA可抑制T細胞受體介導(dǎo)的體外T淋巴細胞增殖， 使KLH致敏脾臟細胞IL4生成增加、 IFNγ水平下降［4］; 系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者服用DHEA治療， 表現(xiàn)出明顯的病情改善， 對糖皮質(zhì)激素治療需求量減少［5］。上述研究提示DHEA影響細胞和體液免疫應(yīng)答。實驗性自身免疫性神經(jīng)炎（experimental autoimmune neuritis， EAN）是CD4+ T細胞介導(dǎo)的外周神經(jīng)自身免疫性脫髓鞘疾病， 是公認的研究格林巴利綜合征（GBS）的經(jīng)典動物模型， 目前國內(nèi)外尚未見有DHEA影響EAN免疫反應(yīng)的報道。基于以往體內(nèi)外研究證實的DHEA對免疫系統(tǒng)的作用， 我們應(yīng)用DHEA干預(yù)發(fā)病初期EAN大鼠， 觀察對細胞免疫反應(yīng)的影響， 以探討治療GBS的新方法。
1 材料和方法
1.1 材料 DHEA、 二甲基亞砜、 弗氏不完全佐劑均購自SigmaAldrich公司; H37Ra株熱滅活結(jié)核桿菌、 植物血凝素（PHA）購自Difco公司; 免疫組化用一抗購自R＆D公司， 二抗購自Invitrogen公司; Ficocl淋巴細胞分離液、 RPMI1640培養(yǎng)液、 胎牛血清均購自Gibco公司; 3H甲基胸腺嘧啶核苷購自中國原子能研究所; 酶聯(lián)免疫分析試劑盒購自Bender MedSystem， Inc公司。超速離心法自牛脊神經(jīng)根提取周圍神經(jīng)髓磷脂（bovine peripheral myelin， BPM）; Lewis大鼠購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司。
1.2 方法
1.2.1 實驗動物分組 6～8周齡雌性Lewis大鼠21只， 質(zhì)量150～170 g， 隨機分為DHEA 0.5 mg/劑治療組（T1）、 2 mg/劑治療組(T2)和對照組(C)， 每組7只。大鼠經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周（SPF級）， 氯胺酮（10 mg/kg）麻醉， 將BPM、 H37Ra株熱滅活結(jié)核桿菌和生理鹽水制成混懸液， 與等量弗氏不完全佐劑充分乳化， 100 μL抗原乳劑（含BPM 5 mg、 結(jié)核桿菌 1 mg）注入雙側(cè)后肢足墊皮下。自免疫后第5天開始皮下注射DHEA， 體積50 μL， 每日1次。對照組每日皮下注射相同體積的DHEA溶媒二甲基亞砜。
1.2.2 免疫組化檢查 于免疫后16 d（EAN高峰期）處死大鼠， 取坐骨神經(jīng)近脊髓段， 40 g/L多聚甲醛固定， 石蠟包埋， 縱行切片（5～6 μm， 每根神經(jīng)2張連續(xù)切片）， 常規(guī)脫蠟致水， 30 mL/L過氧化氫阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性， 枸櫞酸（pH6.0）抗原修復(fù)， 100
mL/L牛血清白蛋白封閉， 滴加一抗室溫下60 min。一抗為羊抗大鼠IFNγ、 TNFα多克隆抗體， 二抗為辣根過氧化酶標(biāo)記兔抗山羊IgG， DAB顯色， 蘇木蘇復(fù)染， 脫水， 透明， 封固。應(yīng)用計算機圖像分析系統(tǒng)40倍物鏡下采集圖像， 每張切片隨機取5個視野， 觀察大鼠坐骨神經(jīng)中細胞陽性反應(yīng)， 細胞核周圍呈棕黃色的浸潤炎性細胞、 施萬細胞、 血管內(nèi)皮細胞計數(shù)為陽性反應(yīng)細胞， 取其平均值， 結(jié)果以細胞數(shù)/mm2組織表示。
1.2.3 體外淋巴細胞增殖試驗 取免疫后16 d EAN大鼠腹股溝、 腘窩淋巴結(jié)和脾臟， 過鋼網(wǎng)研磨制備單個細胞懸液， Ficocl淋巴細胞分離液2 000 r/min， 離心20 min， 收獲單個核細胞， RPMI1640培養(yǎng)液沖洗3次， 懸浮于含100 mL/L胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液， 調(diào)整細胞密度為2×109/L ， 接種到96孔培養(yǎng)板， 200 μL/孔， 分別加入10 μL BPM (終濃度 20 mg/L)、 PHA（終濃度 10 mg /L）或PBS， 培養(yǎng)48 h， 再加入3H甲基胸腺嘧啶核苷1 μCi/孔， 18 h后將細胞收集于玻璃纖維濾器上， β液體閃爍儀檢測胸腺嘧啶核苷結(jié)合量， 結(jié)果以每分鐘放射性熒光閃爍計數(shù)值（cpm）表示。
1.2.4 淋巴細胞培養(yǎng)上清液細胞因子檢測 來自引流淋巴結(jié)和脾臟的單個核細胞懸液（2×109/L）， 加入BPM (終濃度20 mg/L)培養(yǎng)48 h， 收獲上清液。應(yīng)用酶聯(lián)免疫分析試劑盒檢測TNFα、 IFNγ、 IL10， 操作按說明書步驟進行。標(biāo)準(zhǔn)品和樣本均設(shè)雙復(fù)孔， 結(jié)果以ng/L表示。
1.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用 SPSS13.0軟件對資料進行統(tǒng)計分析， 數(shù)據(jù)以x±s表示。應(yīng)用單因素方差分析或秩和檢驗（KruskalWallis檢驗法）進行組間比較， 組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義則用SNK法或 Bonferroni法進行組間兩兩比較， P
2 結(jié)果
2.1 DHEA減少外周神經(jīng)促炎細胞因子產(chǎn)生 應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測EAN高峰期大鼠坐骨神經(jīng)中IFNγ、 TNFα表達， 結(jié)果顯示 DHEA 2 mg治療組和0.5 mg治療組IFNγ、 TNFα陽性反應(yīng)細胞數(shù)均較對照組明顯減少(P
表1 坐骨神經(jīng)細胞因子陽性細胞數(shù)（個/mm2組織）（略）
Tab 1 Numbers of cytokineexpressing cells per mm2 sciatic nerve sections
aP
圖1 坐骨神經(jīng)IFNγ表達（略）
Fig 1 IFNγexpressing cells in sciatic nerve sections
A: Control group; B: DHEA 0.5 mg/day; C: DHEA 2 mg/day.
圖2 坐骨神經(jīng)TNFα表達（略）
Fig 2 TNFαexpressing cells in sciatic nerve sections
A: Control group; B: DHEA 0.5 mg/day; C: DHEA 2 mg/day.
2.2 DHEA抑制淋巴細胞增殖反應(yīng) 于EAN高峰期檢測大鼠引流淋巴結(jié)和脾臟單個核細胞增殖。與對照組比較， DHEA 2 mg治療組和0.5 mg治療組均能明顯抑制BPM和PHA誘導(dǎo)的單個核細胞增殖(P
表2 淋巴細胞體外增殖反應(yīng)（略）
Tab 2 T cell proliferation in vitro (cpm)
aP
2.3 DHEA影響單個核細胞培養(yǎng)上清中細胞因子水平 應(yīng)用ELISA檢測引流淋巴結(jié)和脾臟單個核細胞培養(yǎng)上清中IFNγ、 TNFα、 IL10水平。結(jié)果顯示， 與對照組比較， DHEA 2 mg治療組和0.5 mg治療組均能減少IFNγ和TNFα生成(P
表3 BPM刺激單個核細胞培養(yǎng)上清細胞因子水平比較（略）
Tab 3 Levels of cytokine production by BPMrestimulated spleen cell supernatants
aP
3 討論
DHEA是人體內(nèi)含量最豐富的類固醇， 已有許多研究證實DHEA或其代謝產(chǎn)物可調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞免疫失衡， 可能對自身免疫性疾病有治療作用［6， 7］。EAN是由外周神經(jīng)髓磷脂或其蛋白質(zhì)成分主動免疫或通過過繼轉(zhuǎn)移外周神經(jīng)抗原特異性T細胞在易感嚙齒類動物誘導(dǎo)的， 是CD4+ T細胞介導(dǎo)的外周神經(jīng)自身免疫性脫髓鞘疾病。我們應(yīng)用DHEA干預(yù)發(fā)病初期EAN（免疫后炎癥階段）， 結(jié)果顯示， DHEA 0.5 mg/劑和2 mg/劑兩種劑量均能抑制BPM誘導(dǎo)的單個核細胞增殖， 減少病灶局部及BPM刺激后單個核細胞培養(yǎng)上清IFNγ、 TNFα產(chǎn)生， 提示DHEA可抑制細胞免疫反應(yīng)， 抑制Th1細胞功能。Du等［6］應(yīng)用DHEA治療SJL/J 小鼠過繼轉(zhuǎn)移性EAE， 可阻止病情進展， 降低脊髓促炎性細胞因子IFNγ、 IL12p40、 TNFα、 iNOSmRNA表達。Offner等［8］應(yīng)用人工合成的DHEA衍生物HE2200和DHEA代謝產(chǎn)物HE2500預(yù)防性治療SJL小鼠EAE， 兩者均可減輕疾病嚴(yán)重程度， 降低血漿中PLP特異性抗體水平， 抑制PLP誘導(dǎo)的淋巴細胞增殖， 降低脊髓中TNFα、 TNFβ、 IFNγ、 MIP1α、 MCP1 mRNA表達。上述研究與我們的結(jié)論一致。
外周神經(jīng)內(nèi)膜下T淋巴細胞、 巨噬細胞浸潤及多灶性、 節(jié)段性髓鞘脫失是EAN的主要病理改變， 促炎細胞因子（IFNγ、 TNFα、 IL12、 NO等）在發(fā)病機制中起重要作用。外周神經(jīng)內(nèi)膜下浸潤的T淋巴細胞釋放IFNγ激活巨噬細胞， 后者通過吞噬作用和釋放炎性細胞因子（如TNFα）， 直接損傷神經(jīng)髓鞘。有證據(jù)表明， IFNγ在血清、 外周淋巴組織和周圍神經(jīng)中的水平與EAN臨床癥狀相平行， IFNγ缺失小鼠抵抗EAN的發(fā)生［9］。TNFα被認為在免疫介導(dǎo)的髓鞘脫失中起直接作用， 向大鼠坐骨神經(jīng)中注射TNFα， 導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)膜血管壁淋巴細胞聚積， 髓鞘脫失， 軸索變性［10］。提示IFNγ和TNFα在EAN發(fā)病中的關(guān)鍵作用。本研究顯示， DHEA可降低全身和病灶局部IFNγ、 TNFα水平， 對IL10產(chǎn)生無影響。推測DHEA對EAN的治療作用主要是下調(diào)Th1反應(yīng)， 抑制促炎性細胞因子過度分泌， 對Th2細胞因子水平無影響。
我們的實驗結(jié)果顯示， 與0.5 mg/劑治療組比較， 2 mg/劑治療組能明顯減少單個核細胞培養(yǎng)上清IFNγ、 TNFα產(chǎn)生， 提示DHEA對免疫功能的影響存在劑量相關(guān)性。
細胞因子生成過多是以Th1/Th2為基礎(chǔ)的免疫失調(diào)的中心環(huán)節(jié)， 如何糾正機體的免疫失調(diào)， 是目前治療自身免疫性疾病所面臨的關(guān)鍵問題。雖然DHEA及其代謝產(chǎn)物在調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞功能中的確切作用尚存在爭議［11］， 但是上述實驗結(jié)果表明， 該類分子是促炎性細胞因子過度表達的抑制劑， 可能對T淋巴細胞、 巨噬細胞等多種免疫細胞產(chǎn)生作用， 有希望成為治療自身免疫性疾病的一種新手段。
參考文獻
［1］ von Mühlen D， Laughlin GA， KritzSilverstein D， et al. The Dehydroepiandrosterone And WellNess (DAWN) study: research design and methods［J］. Contemp Clin Trials， 2007， 28(2): 153-168.
［2］ Oberbeck R， Dahlweid M， Koch R， et al. Dehydroepiandrosterone decreases mortality rate and improves cellular immune function during polymicrobial sepsis［J］. Crit Care Med， 2001， 29(2): 380-384.
［3］ Yu CK， Yang BC， Lei HY， et al. Attenuation of house dust mite Dermatophagoides farinaeinduced airway allergic responses in mice by dehydroepiandrosterone is correlated with downregulation of TH2 response［J］. Clin Exp Allergy， 1999， 29(3): 414-422.
［4］ Du C， Guan Q， Khalil MW， et al. Stimulation of Th2 response by high doses of dehydroepiandrosterone in KLHprimed splenocytes［J］. Exp Biol Med (Maywood)， 2001， 226(11): 1051-1060.
［5］ van Vollenhoven RF. Dehydroepiandrosterone for the treatment of systemic lupus erythematosus［J］. Expert Opin Pharmacother， 2002， 3(1): 23-31.
［6］ Du C， Khalil MW， Sriram S. Administration of dehydroepiandrosterone suppresses experimental allergic encephalomyelitis in SJL/J mice［J］. J Immunol， 2001， 167(12): 7094-7101.
［7］ Duan RS， Link H， Xiao BG. Dehydroepiandrosterone therapy ameliorates experimental autoimmune myasthenia gravis in Lewis rats［J］. J Clin Immunol， 2003， 23(2): 100-106.
［8］ Offner H， Zamora A ， Drought H ， et al. A synthetic androstene derivative and a natural androstene metabolite inhibit relapsingremitting EAE［J］. J Neuroimmunol， 2002， 130(1-2): 128-139.
［9］ Zhu Y， Ljunggren HG， Mix E， et al. Suppression of autoimmune neuritis in IFNgamma receptordeficient mice［J］. Exp Neurol， 2001， 169(2): 472-478.
［10］ Weishaupt A， Brück W， Hartung T， et al. Schwann cell apoptosis in experimental autoimmune neuritis of the Lewis rat and the functional role of tumor necrosis factoralpha［J］. Neurosci Lett， 2001， 306(1-2): 77-80.
［11］ Dillon JS. Dehydroepiandrosterone， dehydroepiandrosterone sulfate and related steroids: their role in inflammatory， allergic and immunological disorders［J］. Curr Drug Targets Inflamm Allergy， 2005， 4(3): 377-385.
表2 淋巴細胞體外增殖反應(yīng)（略）
Tab 2 T cell proliferation in vitro (cpm)
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2.3 DHEA影響單個核細胞培養(yǎng)上清中細胞因子水平 應(yīng)用ELISA檢測引流淋巴結(jié)和脾臟單個核細胞培養(yǎng)上清中IFNγ、 TNFα、 IL10水平。結(jié)果顯示， 與對照組比較， DHEA 2 mg治療組和0.5 mg治療組均能減少IFNγ和TNFα生成(P
表3 BPM刺激單個核細胞培養(yǎng)上清細胞因子水平比較（略）
Tab 3 Levels of cytokine production by BPMrestimulated spleen cell supernatants
aP
3 討論
DHEA是人體內(nèi)含量最豐富的類固醇， 已有許多研究證實DHEA或其代謝產(chǎn)物可調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞免疫失衡， 可能對自身免疫性疾病有治療作用［6， 7］。EAN是由外周神經(jīng)髓磷脂或其蛋白質(zhì)成分主動免疫或通過過繼轉(zhuǎn)移外周神經(jīng)抗原特異性T細胞在易感嚙齒類動物誘導(dǎo)的， 是CD4+ T細胞介導(dǎo)的外周神經(jīng)自身免疫性脫髓鞘疾病。我們應(yīng)用DHEA干預(yù)發(fā)病初期EAN（免疫后炎癥階段）， 結(jié)果顯示， DHEA 0.5 mg/劑和2 mg/劑兩種劑量均能抑制BPM誘導(dǎo)的單個核細胞增殖， 減少病灶局部及BPM刺激后單個核細胞培養(yǎng)上清IFNγ、 TNFα產(chǎn)生， 提示DHEA可抑制細胞免疫反應(yīng)， 抑制Th1細胞功能。Du等［6］應(yīng)用DHEA治療SJL/J 小鼠過繼轉(zhuǎn)移性EAE， 可阻止病情進展， 降低脊髓促炎性細胞因子IFNγ、 IL12p40、 TNFα、 iNOSmRNA表達。Offner等［8］應(yīng)用人工合成的DHEA衍生物HE2200和DHEA代謝產(chǎn)物HE2500預(yù)防性治療SJL小鼠EAE， 兩者均可減輕疾病嚴(yán)重程度， 降低血漿中PLP特異性抗體水平， 抑制PLP誘導(dǎo)的淋巴細胞增殖， 降低脊髓中TNFα、 TNFβ、 IFNγ、 MIP1α、 MCP1 mRNA表達。上述研究與我們的結(jié)論一致。
外周神經(jīng)內(nèi)膜下T淋巴細胞、 巨噬細胞浸潤及多灶性、 節(jié)段性髓鞘脫失是EAN的主要病理改變， 促炎細胞因子（IFNγ、 TNFα、 IL12、 NO等）在發(fā)病機制中起重要作用。外周神經(jīng)內(nèi)膜下浸潤的T淋巴細胞釋放IFNγ激活巨噬細胞， 后者通過吞噬作用和釋放炎性細胞因子（如TNFα）， 直接損傷神經(jīng)髓鞘。有證據(jù)表明， IFNγ在血清、 外周淋巴組織和周圍神經(jīng)中的水平與EAN臨床癥狀相平行， IFNγ缺失小鼠抵抗EAN的發(fā)生［9］。TNFα被認為在免疫介導(dǎo)的髓鞘脫失中起直接作用， 向大鼠坐骨神經(jīng)中注射TNFα， 導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)膜血管壁淋巴細胞聚積， 髓鞘脫失， 軸索變性［10］。提示IFNγ和TNFα在EAN發(fā)病中的關(guān)鍵作用。本研究顯示， DHEA可降低全身和病灶局部IFNγ、 TNFα水平， 對IL10產(chǎn)生無影響。推測DHEA對EAN的治療作用主要是下調(diào)Th1反應(yīng)， 抑制促炎性細胞因子過度分泌， 對Th2細胞因子水平無影響。
我們的實驗結(jié)果顯示， 與0.5 mg/劑治療組比較， 2 mg/劑治療組能明顯減少單個核細胞培養(yǎng)上清IFNγ、 TNFα產(chǎn)生， 提示DHEA對免疫功能的影響存在劑量相關(guān)性。
細胞因子生成過多是以Th1/Th2為基礎(chǔ)的免疫失調(diào)的中心環(huán)節(jié)， 如何糾正機體的免疫失調(diào)， 是目前治療自身免疫性疾病所面臨的關(guān)鍵問題。雖然DHEA及其代謝產(chǎn)物在調(diào)節(jié)Th1/Th2細胞功能中的確切作用尚存在爭議［11］， 但是上述實驗結(jié)果表明， 該類分子是促炎性細胞因子過度表達的抑制劑， 可能對T淋巴細胞、 巨噬細胞等多種免疫細胞產(chǎn)生作用， 有希望成為治療自身免疫性疾病的一種新手段。
參考文獻
［1］ von Mühlen D， Laughlin GA， KritzSilverstein D， et al. The Dehydroepiandrosterone And WellNess (DAWN) study: research design and methods［J］. Contemp Clin Trials， 2007， 28(2): 153-168.
［2］ Oberbeck R， Dahlweid M， Koch R， et al. Dehydroepiandrosterone decreases mortality rate and improves cellular immune function during polymicrobial sepsis［J］. Crit Care Med， 2001， 29(2): 380-384.
［3］ Yu CK， Yang BC， Lei HY， et al. Attenuation of house dust mite Dermatophagoides farinaeinduced airway allergic responses in mice by dehydroepiandrosterone is correlated with downregulation of TH2 response［J］. Clin Exp Allergy， 1999， 29(3): 414-422.
［4］ Du C， Guan Q， Khalil MW， et al. Stimulation of Th2 response by high doses of dehydroepiandrosterone in KLHprimed splenocytes［J］. Exp Biol Med (Maywood)， 2001， 226(11): 1051-1060.
［5］ van Vollenhoven RF. Dehydroepiandrosterone for the treatment of systemic lupus erythematosus［J］. Expert Opin Pharmacother， 2002， 3(1): 23-31.
［6］ Du C， Khalil MW， Sriram S. Administration of dehydroepiandrosterone suppresses experimental allergic encephalomyelitis in SJL/J mice［J］. J Immunol， 2001， 167(12): 7094-7101.
［7］ Duan RS， Link H， Xiao BG. Dehydroepiandrosterone therapy ameliorates experimental autoimmune myasthenia gravis in Lewis rats［J］. J Clin Immunol， 2003， 23(2): 100-106.
［8］ Offner H， Zamora A ， Drought H ， et al. A synthetic androstene derivative and a natural androstene metabolite inhibit relapsingremitting EAE［J］. J Neuroimmunol， 2002， 130(1-2): 128-139.
［9］ Zhu Y， Ljunggren HG， Mix E， et al. Suppression of autoimmune neuritis in IFNgamma receptordeficient mice［J］. Exp Neurol， 2001， 169(2): 472-478.
漆畫衍生于七千年沉淀集聚的深厚漆藝文化，起源于古老的傳統(tǒng)漆器裝飾藝術(shù)。八十年代第六屆全國美展中，漆畫被正式列為獨立畫種登上中國當(dāng)代畫壇。而漆畫能從漆器藝術(shù)中獨立出來，大部分原因是由于畫家的參與。作為獨立畫種，漆畫是年輕的新藝術(shù)，若要不斷完善并逐漸成熟，必須廣泛借鑒和吸取其它畫種之長，互相借鑒融合，以長補短，豐富漆畫自身創(chuàng)作的藝術(shù)語言，開拓漆畫藝術(shù)的表現(xiàn)空間，從而促進其繁榮發(fā)展。由于是從中國傳統(tǒng)漆藝脫胎而成，漆畫實際上是對中國傳統(tǒng)的漆藝技法及裝飾畫原有的圖式色彩的被動結(jié)合與吸收。而漆畫的發(fā)展剛剛起步，工匠氣息比較嚴(yán)重，過度強調(diào)工藝性，注重形式上的技巧，而忽略了繪畫藝術(shù)本身的發(fā)展規(guī)律，導(dǎo)致繪畫性表現(xiàn)相對較弱，漆畫語言較為匱乏，降低了漆畫作為繪畫藝術(shù)的藝術(shù)品格。而油畫作為一種發(fā)展成熟極盡完善的世界性藝術(shù)語言，其題材范圍廣泛，色彩豐富，造型語言多種多樣，表現(xiàn)力強烈，繪畫的味道濃厚，且在審美情趣和情感表達等方面都有很鮮明的主題精神和藝術(shù)家的真情流露。這些恰恰是漆畫藝術(shù)創(chuàng)作的不足。
二、漆畫創(chuàng)作過程中對油畫藝術(shù)語言表現(xiàn)形式的借鑒與運用
1、油畫藝術(shù)語言題材的借鑒與運用
中國漆畫由于長期受到傳統(tǒng)漆藝?yán)L畫的影響，即以繪畫性為工藝的限制，主要表現(xiàn)為自然風(fēng)景或花卉植物的圖案，題材表現(xiàn)空間比較狹小。而油畫在悠久歷史發(fā)展中經(jīng)過不斷改革與完善，其創(chuàng)作題材的范圍非常廣泛。油畫家隨時代的變革和科技的進步，涉足的領(lǐng)域越來越寬廣，技法越來越成熟，自主創(chuàng)作的自由度越來越高漲，題材更是多種多樣。漆畫多表現(xiàn)自然，油畫多表現(xiàn)人生。漆畫創(chuàng)作題材可借鑒油畫創(chuàng)作題材中的人物生活題材、愛情題材、軍事歷史題材等不同情感表達和審美情趣，多關(guān)注社會和生活，開拓漆畫藝術(shù)創(chuàng)作的表現(xiàn)空間，提高漆畫作品的藝術(shù)審美價值。
2、油畫藝術(shù)語言造型的借鑒與運用
1）色彩方面：由于漆畫使用大漆，本色屬于暖色，漆畫創(chuàng)作主要使用暖色調(diào)和微妙的冷暖對比，冷暖對比不夠強烈。而油畫中多使用冷色調(diào)，冷暖對比關(guān)系和補色關(guān)系強烈，多依托色彩關(guān)系的對比和結(jié)合來表現(xiàn)油畫主體內(nèi)容，畫面效果較為出眾。漆畫創(chuàng)作的色彩可借鑒油畫創(chuàng)作的色彩冷暖對比關(guān)系、補色關(guān)系和明暗關(guān)系等，豐富漆畫主題內(nèi)容的表達，提升漆畫畫面效果，增強漆畫創(chuàng)作的藝術(shù)表現(xiàn)力。
2）光影方面：漆畫多注重工藝性，在光影的運用上較弱，光影的塑造具有局限性，使其表現(xiàn)空間和發(fā)展空間不夠廣闊。而油畫的畫面經(jīng)過油畫家不斷完善再現(xiàn)自然的主觀意識處理，形成了很好的光影效果。漆畫創(chuàng)作在光影方面可以借鑒油畫創(chuàng)作的光影表現(xiàn)形式，提高漆畫畫面藝術(shù)表現(xiàn)力，促進漆畫繪畫語言的進步和發(fā)展。
3）構(gòu)圖方面：漆畫從傳統(tǒng)漆藝衍生出來，圖案主要為了起裝飾作用，傳統(tǒng)漆畫作品的構(gòu)圖比較簡單，構(gòu)圖方式比較單一，導(dǎo)致畫面效果不夠生動。而油畫創(chuàng)作的過程中，油畫家的自主性更強，繪畫自由度比較高，為追求作品的獨特，油畫作品的構(gòu)圖更講究技巧和效果，構(gòu)圖方式多種多樣，畫面更生動活潑。漆畫創(chuàng)作在構(gòu)圖方面可以借鑒油畫創(chuàng)作中構(gòu)圖的巧妙形式，講究畫面構(gòu)圖效果，脫離傳統(tǒng)漆畫單調(diào)的工匠氣息，使漆畫創(chuàng)作更靈活更有趣。
4）線條方面：漆畫的畫面多為線面結(jié)合，線條語言不夠豐富，整體畫面藝術(shù)表現(xiàn)力較弱，缺乏設(shè)計感。而油畫作品中，直線、曲線、折線等線條種類及線條的平行、垂直、交叉等樣式多種多樣，使畫面更具有設(shè)計感，整體給人感覺比較有藝術(shù)沖擊力，藝術(shù)審美價值相對較高。漆畫創(chuàng)作在線條方面可以借鑒油畫創(chuàng)作中線條的巧妙運用，提升畫面設(shè)計感，豐富漆畫創(chuàng)作繪畫語言，提高漆畫作品的藝術(shù)審美價值。
5）肌理方面：漆畫多注重材料的拼貼，以材料自身肌理為肌理，缺乏根據(jù)畫面效果而做出巧妙肌理效果處理的意識，導(dǎo)致材料的肌理效果沒有更好的被利用。而油畫作品中，主要以繪畫主體做出針對整個畫面效果的肌理處理，講究整體效果或突出主體渲染氣氛等技巧。漆畫創(chuàng)作在肌理方面可以借鑒油畫創(chuàng)作中針對畫面整體效果而做出的肌理處理方式，以整體畫面效果為目的，做出合理恰當(dāng)?shù)牟牧霞±硖幚恚粌H僅是多種材料無意識地堆積。
3、油畫藝術(shù)語言情感的借鑒與運用好的作品一定是令人感動的作品，這就要求作品包含豐富的情感，能引起共鳴。傳統(tǒng)漆畫創(chuàng)作主要是起裝飾的作用，并沒有太多的情感注入，以致使人產(chǎn)生漆畫就是裝飾畫的感覺，忽略了漆畫的精神內(nèi)涵表達。而油畫作品飽含藝術(shù)家的情感投入，油畫藝術(shù)更注重精神表達和情感體驗，很容易使人產(chǎn)生共鳴，這也是為什么說油畫家的作品具有很強烈的社會責(zé)任感，油畫歷史悠久且不斷繁榮發(fā)展，在所有畫種中占據(jù)重要地位的主要原因。作為剛剛登上當(dāng)代畫壇的獨立畫種，漆畫更要注重自身作為繪畫藝術(shù)的藝術(shù)價值，沒有情感的作品只是一張畫，唯有豐富且觸動人心的作品才是承載藝術(shù)使命、具有藝術(shù)價值的優(yōu)秀作品。情感的投入和精神的創(chuàng)造是漆畫繁榮發(fā)展的重要動力，要求漆畫家不斷提升自身的文化素養(yǎng)和人格感悟。
三、在保持漆性本體語言基礎(chǔ)上，探尋符合漆畫
關(guān)鍵詞：藝術(shù)院校影視武打表演
必要性
中圖分類號：G85 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1004―5643（2013）05―0012―03
1 前言
武術(shù)是中國五千年燦爛文化的重要一環(huán)，是中國民族體育的主要內(nèi)容之一，是中國人用以鍛煉身體和防身自衛(wèi)的一種實用的健身方法。與此同時，武術(shù)又蘊含著豐富的藝術(shù)性和美學(xué)特點，極具表演和觀賞價值。
隨著時代前進的步伐，武術(shù)的文化娛樂功能得到了快速的發(fā)展，武術(shù)自身獨特的藝術(shù)價值也在全世界范圍內(nèi)得到了充分的體現(xiàn)。在影視創(chuàng)作領(lǐng)域，中國功夫享譽全球，成就了以李小龍、成龍、李連杰、甄子丹為代表的國際功夫明星，以唐季禮、袁和平、程小東、洪金寶為代表的國際知名動作導(dǎo)演和武術(shù)指導(dǎo)；在舞臺表演領(lǐng)域，華夏武術(shù)名揚四海，2008年北京奧運會開幕式上2008名表演者整齊劃一、動靜結(jié)合的太極拳表演讓世界為之驚嘆，將中國傳統(tǒng)的“天人合一”思想傳播到世界的每一個角落。目前，武術(shù)在專業(yè)設(shè)置歸屬于民族傳統(tǒng)體育之下，根據(jù)1998年教育部頒發(fā)的《普通高等學(xué)校本科專業(yè)介紹》，民族傳統(tǒng)體育的培養(yǎng)目標(biāo)是“本專業(yè)培養(yǎng)具備民族傳統(tǒng)體育教學(xué)、訓(xùn)練、科研基本知識與技能的，能從事武術(shù)、傳統(tǒng)體育養(yǎng)生及民族民間體育工作的專門人才”。白專業(yè)設(shè)置以來，民族傳統(tǒng)專業(yè)的招生數(shù)量大量增加，武術(shù)作為民族傳統(tǒng)體育專業(yè)主要的方向，為我國培養(yǎng)了無數(shù)優(yōu)秀人才，但同時也反映出了一些問題，比如因為開設(shè)時間較短，學(xué)科建設(shè)不夠完善，專業(yè)教學(xué)以實踐課程為主，理論課程較少，同時實踐課又以競技武術(shù)套路和散打為主，其他項目或傳統(tǒng)項目較少，使得培養(yǎng)的學(xué)生知識結(jié)構(gòu)較為單一，就業(yè)的面比較窄，嚴(yán)重影響了近年來的本專業(yè)學(xué)生的就業(yè)率和在市場中綜合競爭力。
隨著我國影視業(yè)和傳媒業(yè)的快速發(fā)展，大大小小的影視公司、表演團體對武術(shù)表演專業(yè)人才的需求隨之?dāng)U大。在此背景下，我國第一個武術(shù)表演本科專業(yè)已在上海體育學(xué)院正式誕生。上海體育學(xué)院于2011年3月獲教育部批準(zhǔn)開設(shè)了表演專業(yè)武術(shù)表演方向，并于2012年2月進行了首屆招生的專業(yè)考試，這意味著武術(shù)表演專業(yè)在我國本科教育的發(fā)展道路上已經(jīng)邁出了可喜的一步。據(jù)資料調(diào)查，尚未發(fā)現(xiàn)有藝術(shù)院校開設(shè)影視武打表演專業(yè)方向，而藝術(shù)院校有著多年的表演專業(yè)，編導(dǎo)專業(yè)的學(xué)科建設(shè)，師資隊伍等強大的優(yōu)勢，以及和各大影視公司，表演團體緊密的關(guān)系，能更好的保證培養(yǎng)出來的人才更好的就業(yè)，同時這種理論學(xué)習(xí)和實踐相結(jié)合的培養(yǎng)模式能更好的為用人單位服務(wù)。
2 研究方法
2.1 文獻資料法
通過查閱全國各招收民族傳統(tǒng)體育專業(yè)的院校課程開設(shè)方案，從中國期刊網(wǎng)、中國博碩士查閱相關(guān)學(xué)術(shù)論文，分析相關(guān)研究。
2.2 專家訪談法
本文對相關(guān)問題對民族傳統(tǒng)體育專業(yè)和表演專業(yè)、招生辦等專家進行了訪談，對本文的研究提出了合理化建議。
3 研究結(jié)果與分析
3.1 武術(shù)市場發(fā)展的需要
中華武術(shù)通過與電影電視相結(jié)合開辟了一種新形式，更加生動的出現(xiàn)在世界的各個角落。從中國第一部電影《定軍山》，到上世紀(jì)70年代李小龍拍攝的一系列電影如《精武門》、《猛龍過江》等，在全世界刮起了一陣中國功夫熱，李小龍的電影讓西方人真正領(lǐng)略了中國功夫的魅力，特別是80年代初的《少林寺》再次掀起了全民甚至世界的武術(shù)學(xué)習(xí)風(fēng)潮，在后期的《臥虎藏龍》《英雄》等影片的放映，加上成龍、李連杰、楊紫瓊等國際功夫巨星的出現(xiàn)，讓世界更多的了解了武術(shù)。影視傳媒為武術(shù)的傳播、武術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展等產(chǎn)生著越來越大的影響。特別是近年來，隨著國家提出大力發(fā)展文化產(chǎn)業(yè)，使其尤為重要。
而在影視武打的拍攝過程中面臨著會打不會演或會演不會打的難題，目前已經(jīng)有一部分武術(shù)的畢業(yè)生加入到了影視武打的行業(yè)中，但因為沒有專業(yè)的表演基礎(chǔ)，大多從事替身或群眾演員的工作。一部好的影視武打作品，往往決定于好的武術(shù)指導(dǎo)，其負責(zé)片中武打動作的設(shè)計、指導(dǎo)以及后期達到的影視效果、聲音效果等，每個武打動作從演員的演練到觀眾看到的影視作品，往往要經(jīng)過導(dǎo)演和武打編導(dǎo)影視化、戲劇化、藝術(shù)化、表演化的改裝，從而將每個動作達到準(zhǔn)確到位，優(yōu)美合理。
3.2 武術(shù)文化傳播的需要
中華武術(shù)作為中華民族的優(yōu)秀傳統(tǒng)體育文化，影視武打?qū)⒅袊鴤鹘y(tǒng)的武術(shù)、武戲、武舞、武樂、雜技以及古代文學(xué)等結(jié)合到一起，將武術(shù)技擊性、修身養(yǎng)性的特點通過表演藝術(shù)展現(xiàn)出來，以影視作品的形式展現(xiàn)在世人面前，從而讓武術(shù)以不同時代可以接受的層次得到充分的發(fā)揚和光大。
因此，影視傳煤不僅將武術(shù)的技術(shù)動作和技巧通過聲音、圖像的形式進行了傳播，同時將武術(shù)的信息超越了時間、空間的限制，而且克服了對受眾知識水平的限制，最大限度地擴大了信息傳播的范圍，改變了以前通過家族式、師徒式的傳播方式和靠聲音、動作傳播的手段，更加形象地將武術(shù)的技術(shù)動作和文化進行了傳播。影視作為一種大眾傳媒手段，促進了武術(shù)的傳播和發(fā)展。
3.3 高校畢業(yè)生就業(yè)形勢的需要
武術(shù)專業(yè)的畢業(yè)生主要就業(yè)方向是公安系統(tǒng)、武術(shù)訓(xùn)練隊、武術(shù)教學(xué)工作、保安公司等，當(dāng)然也有一部分學(xué)生在從事武術(shù)的表演工作，但據(jù)資料記載，近兩年的畢業(yè)生就業(yè)率為60―70%，所以在延續(xù)傳統(tǒng)人才培養(yǎng)模式的基礎(chǔ)上如何發(fā)展創(chuàng)新，將是影響武術(shù)專業(yè)發(fā)展的重要課題。目前主要就業(yè)的是公安系統(tǒng)和武術(shù)教學(xué)，考公務(wù)員和教師資格證書也成了這些人必須要通過的畢業(yè)前的坎，但因為近幾年公務(wù)員報名和招錄比例的大幅減少，加上較好學(xué)校所需武術(shù)教師基本趨于穩(wěn)定，使得武術(shù)專業(yè)畢業(yè)生的就業(yè)壓力越來越大。在市場經(jīng)濟體制下，一個專業(yè)辦的好與賴，一個很重要的因素是就業(yè)率，隨著社會的發(fā)展，如果我們不去調(diào)整已有的專業(yè)培養(yǎng)方案或模式，勢必會使培養(yǎng)出來的人才越來越和市場背離，被市場淘汰。
影視武打從工資的性質(zhì)一般可以分為動作演員、動作指導(dǎo)、動作導(dǎo)演、替身、特技等幾種，這些從業(yè)人員目前均是一些有武術(shù)功底的人員在一些有經(jīng)驗的武術(shù)導(dǎo)演或指導(dǎo)的帶領(lǐng)下，經(jīng)過在劇組的實踐，邊實踐邊學(xué)習(xí)，不斷總結(jié)經(jīng)驗，逐步發(fā)展起來的。另外隨著多媒體的發(fā)展，網(wǎng)絡(luò)和手機的用戶越來越多，武術(shù)游戲也得到了快速的開發(fā)，游戲的武術(shù)指導(dǎo)同樣需要專業(yè)的人才。因目前沒有專門的院校開設(shè)此類專業(yè)，所以開設(shè)此專業(yè)培養(yǎng)合格人才有很大的必要性。
3.4 學(xué)生自身發(fā)展的需要
通過對我國開設(shè)民族傳統(tǒng)體育專業(yè)的院校的課程設(shè)置和學(xué)時分配看出，現(xiàn)有武術(shù)專業(yè)方向基本是學(xué)習(xí)武術(shù)套路為主，再輔助散打、跆拳道等的學(xué)習(xí)，學(xué)習(xí)的內(nèi)容較為單一，固定，二大多數(shù)考上的學(xué)生也是從小練習(xí)這些項目的，所以使學(xué)生漸漸失去了興趣，減少了學(xué)習(xí)的積極性，也就降低了教學(xué)效果。近年來注重武術(shù)攻防技擊性的教學(xué)使得學(xué)生越來越感興趣，所以武術(shù)的小的攻防組合或者對練不但可以改進教學(xué)效果，同樣可以拓寬學(xué)生的思路，使得學(xué)生不但在傳統(tǒng)模式的教學(xué)下學(xué)的以后教學(xué)的本領(lǐng)，同樣可以讓學(xué)生通過課上練習(xí)，引發(fā)對影視武打的關(guān)注，為以后學(xué)生的就業(yè)拓寬道路。
同時，隨著武打影視作品的大量出現(xiàn)，人們對影視需求的不斷攀升，越來越多的學(xué)生對于影視武打作品中的角色扮演和其自身的挑戰(zhàn)性感興趣，并且隨著成龍、李連杰、洪金寶等影視武打明星和指導(dǎo)的社會地位和經(jīng)濟基礎(chǔ)的不斷發(fā)展，使得越來越多的武術(shù)愛好者欲從事武術(shù)表演的行列，這些學(xué)生正好有一定的武術(shù)功底，再加上年齡的特點，對于學(xué)習(xí)影視武打的要求越來越強。
3.5 專業(yè)結(jié)構(gòu)設(shè)置發(fā)展的需要
高校培養(yǎng)的人才就是為了社會的需要，根據(jù)市場的需要，不斷的改進教學(xué)內(nèi)容和人才培養(yǎng)方案，使學(xué)校和市場結(jié)合，培養(yǎng)出為市場所接受的合格人才，以保證專業(yè)的可持續(xù)性發(fā)展。專業(yè)是高校人才培養(yǎng)的載體，是高校推進教育教學(xué)改革、提高教育教學(xué)質(zhì)量的立足點，其建設(shè)水平和績效決定著高校的人才培養(yǎng)質(zhì)量和特色。
【摘要】 目的： 建立實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠模型并做病理學(xué)及影像學(xué)鑒定，為研究多發(fā)性硬化的發(fā)病機制奠定基礎(chǔ)。方法： C57BL/6雌性小鼠80只，分為EAE 1組、EAE 2組、EAE 3組、EAE 4組，各15只，用MOG35-55抗原加完全弗氏佐劑不同注射方法制作EAE小鼠模型；佐劑組10只用生理鹽水代替MOG3555制備免疫乳劑，對照組10只僅注射生理鹽水；用MRI對小鼠腦和脊髓進行掃描，HE、LFB染色和Bielschowskys銀染觀察小鼠腦和脊髓病理學(xué)改變。結(jié)果： 免疫后第14天，EAE 1組、EAE 2組、EAE 3組、EAE 4組小鼠開始出現(xiàn)EAE臨床癥狀，發(fā)病率分別為80%、80%、73%、67%；EAE 2組、EAE 3組小鼠臨床癥狀評分與EAE 1組比較，P＞0.05，EAE 4組小鼠臨床癥狀評分與EAE 1組比較，P＜0.05；佐劑組與對照組小鼠均未出現(xiàn)臨床神經(jīng)系統(tǒng)癥狀；EAE小鼠腦和脊髓小血管周圍炎細胞浸潤呈袖套狀或脫髓鞘改變，神經(jīng)元變性及軸突損傷，MRI可顯示腦和脊髓病灶。結(jié)論： 應(yīng)用背部、頸部、腋窩、蹊部多點注射可提高EAE發(fā)病率，1次免疫與兩次免疫小鼠對EAE發(fā)病率的影響沒有明顯差別。
【關(guān)鍵詞】 腦脊髓炎； 腦； 脊髓； 神經(jīng)元； 磁共振成像； 小鼠
［Abstract］ Objective: To establish autoimmune encephalomyelitis (AE) mouse model and observe its pathological and imaging appearance， and so as to provide a basis for study of pathological mechanism and therapy of multiple sclerosis. Methods: Eighty C57BL/6 female mice were pided randomly into 6 groups， with 15 in each of groups of EAE1， EAE2， EAE3， and EAE4. Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) were induced in mice of the 4 groups with 300μg of MOG35-55 plus complete Freund's adjuvant (CFA) by different methods. Mice in adjuvant group (group ADJ， n=10) were treated with CFA plus normal saline， while mice in control group (group CON， n=10) treated with normal saline only. MRI examination and pathological observation on the brain and spinal cord were carried out on mice in groups of EAE1， ADJ， and CON. Methods used in pathological observation included HE staining， Luxol Fast Blue staining， and Bieschowsky silver staining. Results: Clinical symptoms of EAE appeared in mice of groups EAE1， EAE2， EAE3， and EAE4 in 14 days after immunization， and the incidences were 80%， 80%， 73%， and 67% respectively. Clinical symptom scores of groups EAE2 and EAE3 were not statistically different from that of group EAE1(P＞0.05)， while that of group EAE4 had statistically significant difference from that of group EAE1(P＜0.05). No obvious EAE symptom was found in groups ADJ or CON. Pathological observation showed inflammatory cuff around small blood vessels， demyelization，degeneration of neurons， and axonal injury in brain and spinal cord of mice in EAE groups. Foci of disease in brain and spinal cord were showed by MRI. Conclusions: Multipoint injection at back， neck， armpit， and groin could increase the incidence of EAE. Twice injection of reagent does not make significant difference from one single injection in the incidence of EAE.
［Key words］ encephalomyelitis; brain; spinal cord; neurons; magnetic resonance imaging; mice
多發(fā)性硬化（multiple sclerosis，MS）是一種主要累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥性、多發(fā)性的脫髓鞘自身免疫性疾病，具有癥狀復(fù)雜多變、緩解與復(fù)發(fā)交替進行、病程遷延不規(guī)律等特點，迄今尚未完全明確其病因和發(fā)病機制[1]，也沒有特效的治療方法。實驗性自身免疫性腦脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）是一種由活化T細胞介導(dǎo)的器官特異性自身免疫性疾病，主要病理特征為血管周圍炎性細胞浸潤和神經(jīng)脫髓鞘反應(yīng)，在臨床癥狀、生化指標(biāo)及病理等方面與MS具有相似的特征，因此EAE被認為是研究MS的良好動物模型。2009年3月～2009年7月，參照國內(nèi)外文獻報道的方法[2，3]，以完全弗氏佐劑與MOG35-55制備的乳化抗原，輔以腹腔注射百日咳毒素，成功建立了C57BL/6小鼠的EAE模型，通過病理學(xué)和影像學(xué)鑒定該模型的可靠性，為進一步研究MS的發(fā)病機制和治療方法奠定動物模型基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 主要試劑
MOG3555多肽MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK購自西安美聯(lián)多肽合成有限公司，純度>97%，-20 ℃保存?zhèn)溆?；國產(chǎn)百日咳毒素由成都生物制品研究所饋贈，卡介苗購自中國藥品生物制品檢定所；進口百日咳毒素、Luxol fast blue、焦油紫、完全弗氏佐劑、硝酸銀均購自美國Sigma公司；結(jié)核桿菌H37Ra購自美國Difco公司，重鉻酸鉀、碳酸鋰、伊紅等化學(xué)試劑購自恒因生物有限公司。
1.2 實驗動物及分組
雌性C57BL/6小鼠80只，4～8周齡，體質(zhì)量15～20 g，購自重慶醫(yī)科大學(xué)動物室。按照隨機對照分組的原則將小鼠分為6組：EAE 1組（國產(chǎn)試劑多處一次免疫）、EAE 2組（國產(chǎn)試劑多處兩次免疫）、EAE 3組（進口試劑多處一次免疫）和EAE 4組（國產(chǎn)試劑背部一次免疫），每組15只，佐劑組和對照組各10只。
1.3 EAE模型制備
用0.01 mol/L的PBS將MOG35-55稀釋成300 mg/L，然后將稀釋液與等量的完全弗氏佐劑(卡介苗的終濃度為10 g/L或結(jié)核桿菌H37Ra終濃度為5 g/L)混合，用玻璃注射器抽打至油包水狀態(tài)，制成誘導(dǎo)EAE的抗原乳劑。佐劑組則以生理鹽水代替抗原肽制備免疫乳劑，對照組僅注射生理鹽水。EAE 1組、EAE 2組小鼠分別于背部、頸部、腋窩、蹊部4點皮下注射相應(yīng)抗原(卡介苗的終濃度為10 g/L)0.2 ml/只，EAE 4組小鼠于背部四點皮下注射相應(yīng)抗原(卡介苗的終濃度為10 g/L)0.2 ml/只，EAE 3組小鼠分別于背部、頸部、腋窩、蹊部4點皮下注射相應(yīng)抗原（結(jié)核桿菌H37Ra的終濃度為5 g/L）0.2 ml/只，免疫當(dāng)天為第0天。于第0、2天給予EAE 1組、EAE 2組、EAE 4組和佐劑組小鼠腹腔注射國產(chǎn)百日咳毒素0.4 mg/只，給予EAE 3組注射進口百日咳毒素0.2 mg/只。于第7天給予EAE 2組小鼠再次于背部、頸部、腋窩、蹊部4點皮下注射相應(yīng)抗原(卡介苗的終濃度為10 g/L)0.2 ml/只。
1.4 體重監(jiān)測及神經(jīng)功能評分
第0天開始，每日稱體重，觀察小鼠的攝食情況，并采用雙盲法每天兩次進行神經(jīng)功能評分，評分標(biāo)準(zhǔn)為通用的0～5級評分法：0級，不發(fā)??；1級，小鼠尾部張力降低或麻痹；2級，小鼠尾部麻痹，后肢無力；3級，小鼠后肢癱瘓；4級，小鼠四肢癱瘓，人為翻身不能復(fù)位；5級，瀕死狀態(tài)或發(fā)病后死亡。
1.5 組織取材與影像學(xué)、病理學(xué)檢查
小鼠發(fā)病后第3天，EAE 1組、佐劑組、對照組分別取5只小鼠予10%水合氯醛麻醉后放在柔性線圈中間行常規(guī)腦和脊髓MRI檢查（1.5T超導(dǎo)型全身MRI掃描系統(tǒng)，17 cm柔性線圈，行冠狀位與軸位掃描）。影像學(xué)檢查后將動物斷頸處死，立即在無菌條件下取出腦；一次性20 ml無菌注射器用滅菌生理鹽水沖出完整的脊髓，其中部分立即浸入4%多聚甲醛液中固定12～24 h，冰凍切片，同一部位5 μm切片行HE染色和30 μm切片用常規(guī)方法行Luxol Fast Blue（LFB）染色；另一部分用常規(guī)方法行Bielschowskys銀染。在光鏡下觀察炎性細胞浸潤、脫髓鞘改變及軸突損傷。
1.6 統(tǒng)計學(xué)方法
計量資料均以（x±s）表示，采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，組間比較采用F檢驗及t檢驗，P
2 結(jié)果
2.1 臨床表現(xiàn)
免疫后每天對小鼠進行臨床評分，EAE1組、EAE2組、EAE3組、EAE4組小鼠免疫后第14～19天開始陸續(xù)發(fā)病，發(fā)病前毛色發(fā)暗，活動減少，食欲較差，反應(yīng)遲鈍，發(fā)病率為80%、80%、73%、67%。首發(fā)癥狀多為尾部遠端無力下垂，體重明顯減輕，臨床評分隨著時間延長加重，第18～22天為高峰，表現(xiàn)為尾部完全松弛無力，蹣跚步態(tài)，后肢或四肢癱瘓，人為翻身不能及不能站立等。發(fā)病高峰過后，EAE小鼠的體重逐漸恢復(fù)，癥狀有所緩解，但直至第35天仍有部分小鼠遺留有尾部拖垂的癥狀。EAE2組、EAE3組小鼠臨床癥狀評分與EAE1組比較，P＞0.05。EAE4組小鼠臨床癥狀評分與EAE1組比較，P＜0.05。佐劑組和對照組均未出現(xiàn)臨床神經(jīng)系統(tǒng)癥狀(表1)。表1 各組臨床表現(xiàn)比較（略）注：(1)與EAE 1組比較P
2.2 腦和脊髓病理學(xué)改變
佐劑組和對照組小鼠的腦和脊髓HE、LFB染色和Bielschowskys銀染均未發(fā)現(xiàn)明顯異常改變。EAE 1組小鼠發(fā)病第3天HE染色可見腦干、小腦、大腦和脊髓白質(zhì)區(qū)內(nèi)有不同程度的炎性細胞浸潤，以脊髓、腦干最常見（圖1A），多見于小血管旁，呈血管袖套樣改變（圖1B）；神經(jīng)細胞腫脹、變性、壞死（圖1C）；大腦皮質(zhì)下的白質(zhì)區(qū)可見散在膠質(zhì)細胞聚集（圖1D）及膠質(zhì)小結(jié)形成（圖1E），甚至能看見噬神經(jīng)現(xiàn)象（圖1F）。LFB染色可見在腦和脊髓白質(zhì)中有大小不等的片狀髓鞘脫失區(qū)（圖2）。Bielschowskys銀染可見腦和脊髓有軸突呈節(jié)段性損傷（圖3）。
2.3 MRI掃描
佐劑組和對照組小鼠腦和脊髓MRI掃描均未發(fā)現(xiàn)明顯病灶。EAE1組小鼠發(fā)病第3天行腦和脊髓冠狀位(圖4A)與軸位（圖4B)T2加權(quán)像掃描，發(fā)現(xiàn)病變多分布于腦干、小腦和脊髓，呈多個散在斑點狀長T2高信號病灶，但在T1加權(quán)像中不易辨認，只有臨床癥狀3分及3分以上的小鼠腦室周圍出現(xiàn)散在病灶。
3 討論
對MS研究需要標(biāo)準(zhǔn)化的動物模型，這也是研究結(jié)果被公認的基礎(chǔ)。目前EAE的動物模型很多，主要分為免疫誘導(dǎo)和病毒誘導(dǎo)2種，應(yīng)用最廣泛的是免疫誘導(dǎo)的EAE。EAE模型可分為急性型、慢性遷延型和復(fù)發(fā)緩解型三類，不同的免疫源、動物種系和誘導(dǎo)方法可建立不同的模型，所反映的機制亦不相同[4]。因此，根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇不同的EAE模型，模型的成功建立是整個研究的前提條件。EAE通常是由注射抗中樞神經(jīng)系統(tǒng)的主要抗原或相關(guān)致腦炎因子肽鏈片段引起易感動物的自身免疫性疾病，主要是由對髓鞘堿性蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein，MOG)、髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白(myelin proteolipid protein，PLP)、少突膠質(zhì)細胞糖蛋白等抗原決定基具有特異性的CD4+的MHC-Ⅱ限制性Th1細胞所引起。文獻報道制備EAE模型的方法很多，其敏感品系多為嚙齒類動物，如Lewis大鼠、SJL小鼠、PJ小鼠等。
研究發(fā)現(xiàn)，MOG和抗M0G抗體在MS的發(fā)病過程中起重要作用，MOG基因突變使MS的易感性增高[5]，在MS患者血清中可以檢測到抗MOG抗體，該抗體能特異性的結(jié)合在MS病灶處的髓鞘上并使之分解[6]。雖然MOG在髓鞘蛋白中含量很少，只占總髓鞘蛋白成分的0.01%～0.05%，但由于它存在于髓鞘膜和少突膠質(zhì)細胞的最外層，故具高度免疫原性。因此，研究MOG誘導(dǎo)的EAE模型可以為更好的闡明MS的發(fā)病機制提供重要信息[7]。近年來，用MOG誘導(dǎo)EAE逐漸成為國際上研究MS的主要模型。本研究中選用的實驗動物C57BL/6純系小鼠在國內(nèi)的來源較為廣泛，具有遺傳背景明確和相關(guān)的檢測試劑豐富的優(yōu)點，而MOG3555多肽的結(jié)構(gòu)明確，可精確定量。本實驗總結(jié)國內(nèi)外實驗經(jīng)驗，對各種藥物濃度、實驗方法進行了對比分析，成功建立了理想的EAE小鼠模型。（1）百日咳毒素和卡介苗是免疫原性的佐劑，實驗中發(fā)現(xiàn)，同等濃度的國產(chǎn)百日咳毒素、卡介苗用量需是進口百日咳毒素和H37RA結(jié)核分枝桿菌的兩倍才能有效免疫動物，應(yīng)用國產(chǎn)試劑價格便宜，只要把握好劑量同樣能得到理想的EAE小鼠，有利于該模型的推廣應(yīng)用；（2）應(yīng)用背部、頸部、腋窩、蹊部多點注射與僅背部多點注射相比較，能提高發(fā)病率；（3）有文獻報道，需兩次注射MOG3555抗原加完全弗氏佐劑免疫乳劑誘導(dǎo)發(fā)病，本實驗發(fā)現(xiàn)1次給藥與兩次給藥對發(fā)病率的影響沒有明顯差別；（4）本實驗采用Bielschowskys銀染顯示了EAE小鼠模型的軸突損傷病理性特征，與國內(nèi)外報道相一致[8]；(5)影像學(xué)提示的病變位置與病理學(xué)結(jié)果相一致，病灶呈多發(fā)性，但主要集中于小腦、腦干和脊髓，而人類多發(fā)性硬化腦部病灶多見于腦室系統(tǒng)周圍，其次才是胼胝體與腦室之間、小腦、腦干、基底節(jié)區(qū)及灰質(zhì)，提示EAE小鼠主要發(fā)病部位與人類MS不完全相同，與國外報道相同[9]。
本次實驗所復(fù)制的慢性EAE模型具有發(fā)病率高、死亡率低、模型穩(wěn)定、動物來源方便、其病理改變更加接近MS，是研究MS的一種理想的動物模型，為進一步的研究提供了動物準(zhǔn)備。
參考文獻
[1]Pryce G，Baker D. Emerging properties of cannabinoid medicines in management of multiple sclerosis[J]. Trends Neurosci， 2005（5）: 272-276.
[2]王菊蓉， 張冉， 王棟，等. C57BL/6小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型的建立[J]. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報， 2006（10）:1089-1091.
[3]Stefanie K， Sita J， Magdalena T， et al. Fundamental differences in the dynamics of CNS lesion development and composition in MP4- and MOG peptide 3555induced experimentalautoimmune encephalomyelitis[J]. Clinical Immunology， 2008（2）: 256-267.
[4]Bettelli E. Building different mouse models for human MS[J]. Ann N Y Acad Sci， 2007（1103）:11-18.
[5]D Alfonso S， Bolognesi E， Guerini FR， et al. A sequence variation in the MOG gene is involved in multiple sclerosis susceptibility in Italy[J]. Genes Immun， 2008（1）:7-15.
[6]Lolli F， Rovero P， Chelli M， et al. Antibodies against glycosylated native MOG are elevated in patients with multiple sclerosis[J]. Neurology， 2005（65）:781-782.
[7]Chekhonin VP， Semenova AV， Gurina OI， et al. Myelin oligodendrogliocyte glycoprotein: the structure， functions， role in pathogenesis of demyelinating disorders[J]. Biomed Khim， 2003（5）:411-423.
